一种鉴别注射用核糖核酸Ⅱ的方法

摘要

本发明公开了一种检测注射用核糖核酸Ⅱ的方法，包括如下步骤：将待测物质的核酸酶水解溶液进行高效液相色谱分析，采用的色谱柱为Agilent ZORBAX SB-AQ C₁₈色谱柱，流动相为甲酸溶液和乙腈溶液的混合物；若经上述分析后，确定所述待测物质含有胞嘧啶核苷酸、尿嘧啶核苷酸、鸟嘌呤核苷酸、鸟嘌呤核苷和腺嘌呤核苷5种物质，则所述待测物质为或候选为注射用核糖核酸Ⅱ；反之，则所述待测物质不为或候选不为注射用核糖核酸Ⅱ。本发明利用高效液相色谱技术，建立了专属性强的“注射用核糖核酸Ⅱ”的质控方法，对于提高该药的科技含量、增加安全性、有效性、降低成本、扩大生产规模、提高市场占有率、向国际市场迈进具有重要意义。

主权项

鉴别注射用核糖核酸Ⅱ的方法，包括如下步骤：将待测物质的核酸酶水解溶液进行高效液相色谱分析； 所述高效液相色谱分析中采用的色谱条件如下：色谱柱为Agilent ZORBAX SB‑AQ C₁₈色谱柱，流动相为如下流动相A和流动相B，依次采用所述流动相A和所述流动相B进行洗脱；流动相A：甲酸水溶液；流动相B：体积比为80：20的甲酸水溶液与乙腈水溶液的混合溶液；所述流动相具体为：洗脱时间为0‑10min时，1‰甲酸‑5%乙腈的混合溶液，体积比100：0；洗脱时间为10～60min时，1‰甲酸与5%乙腈的混合溶液，体积比80：20；其中，1‰甲酸浓度为1g/1000ml，5%乙腈为5 g/100ml；流速为1ml/min；检测波长为260nm；柱温为25℃；注射用核糖核酸Ⅱ应在胞嘧啶核苷酸、尿嘧啶核苷酸、鸟嘌呤核苷酸、鸟嘌呤核苷和腺嘌呤核苷5种物质的保留时间处出峰。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（1）中所述待测物质的核酸酶水解溶液的获得方法包括如下步骤：将所述待测物质与所述核酸酶按照质量比为5：1的比例溶解于水中，得到所述待测物质的核酸酶水解溶液。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤（1）中所述待测物质的核酸酶水解溶液的获得方法还包括将所述待测物质与所述核酸酶按照质量比为5：1的比例溶解于水中后，进行60℃温育的步骤。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：进样量为5～20μl。