一种从红豆杉中提取紫杉醇的方法

摘要

本发明公开了一种从红豆杉中提取紫杉醇的方法，属于药物提取技术领域。本发明的提取方法是用甲醇溶液温浸提取红豆杉树皮或枝叶粉末，然后氯仿萃取，使用两次硅胶柱层析，分别用氯仿-甲醇梯度溶液、正己烷-乙酸梯度溶液洗脱，除去极性杂质，得到紫杉醇粗品。进一步地，进行第三次正相柱层析，用经化学处理过的硅胶作为固定相，可以有效分离出紫杉醇，柱层析得到的紫杉醇重结晶一次，即可得到纯度98%以上的紫杉醇纯品，工艺转移率为80%以上。本发明的提取方法中使用的所有试剂均为工业级，适用性广，创新性强，且工艺步骤简单，分离成本较低,产品收率较大，对于紫杉醇的工业分离制备生产具有创新性的应用价值。

主权项

一种从红豆杉中提取紫杉醇的方法，其特征在于步骤如下：(1)取红豆杉树皮或枝叶粉碎后所得粗粉用甲醇水溶液40～50℃温浸提取3次，合并提取液，减压回收得浸膏，加氯仿萃取5次，合并氯仿萃取层，减压回收至干；减压回收至干的产品用石油醚脱脂，得到的脱脂浸膏再用氯仿溶解，进行下一步骤操作；(2)200～300目硅胶干法装柱，氯仿预平衡后用步骤(1)所得产品掺入与产品等量的200～300目硅胶上样，氯仿‑甲醇梯度洗脱，TLC检识到紫杉醇后收集含有紫杉醇的洗脱流份；所得洗脱流份减压回收至油状，再用丙酮溶解、过滤，滤液加正己烷搅拌均匀，放置后抽滤，抽滤所得滤饼减压干燥，再用正己烷溶解，加等量硅胶拌样，减压干燥后粉碎，用氯仿混悬后用于步骤(3)上样；(3)200～300目硅胶干法装柱，正己烷平衡后用步骤(2)所得产品上样，正己烷‑乙酸乙酯梯度洗脱，TLC及HPLC检识到紫杉醇后收集含有紫杉醇的洗脱流份，减压回收至干得紫杉醇粗品；(4)取300～400目硅胶，用二氯甲烷湿法装柱及预平衡，紫杉醇粗品用二氯甲烷溶解后上样，二氯甲烷‑乙酸乙酯梯度洗脱，TLC及HPLC检识到紫杉醇后收集紫杉醇纯度大于98％的洗脱流份，得到纯品紫杉醇；所述装柱条件为：取21kg300～400目薄层硅胶、氧化亚铜100g～150g、氯化铵100g～150g、盐酸羟胺100g～150g混合后，用16L甲醇和6L纯化水混合液溶解成浆糊状，搅拌后于80～90℃减压干燥，用55L二氯甲烷溶成糊状，装柱；其中，步骤(1)中甲醇水溶液中甲醇体积百分比为80％，3次提取加入的甲醇水溶液质量分别为红豆杉树皮或枝叶粗粉质量的8倍、6倍、6倍；步骤(1)中氯仿加入量为浸膏的0.5倍，萃取次数为5次；步骤(2)收集的洗脱流份为氯仿与甲醇体积比为100:1.5的洗脱液洗脱下来的溶液；步骤(3)收集的洗脱流份为正己烷与乙酸乙酯体积比为1：1的洗脱液洗脱下来的溶液；步骤(4)收集的洗脱流份为二氯甲烷与乙酸乙酯体积比为1:1的洗脱液洗脱下来的溶液。