一种制备美那诺坦的方法

摘要

本发明公开了一种制备美那诺坦的方法，包括以下步骤：1)由Fmoc-L-Val-OH和氨基树脂出发，得到Fmoc-L-Val-氨基树脂；2)将Fmoc-L-Val-氨基树脂采用固相合成方法按美那诺坦的多肽序列顺序逐一偶联得到N端为游离氨基的含侧链保护基团的美那诺坦-氨基树脂；3)乙酰化反应生成含侧链保护基团的美那诺坦-氨基树脂；4）采用裂解试剂裂解含侧链保护基团的美那诺坦-氨基树脂，冰乙醚沉淀得到粗肽；粗肽经过纯化、冻干得到美那诺坦。本发明采用的制备美那诺坦的工艺方法具有广泛的应用前景和可观的经济实用价值。

主权项

一种制备美那诺坦的方法，包括以下步骤:1) 将氨基树脂置于反应器中，经NMP洗涤溶胀后；将体积比1:4的哌啶NMP溶液加至溶胀的氨基树脂中脱除氨基树脂上的Fmoc保护基；加入相当于氨基树脂用量1.5‑10倍量的Fmoc‑L‑Val‑OH、1.5‑10倍量的HOBt、1.5‑10倍量的HBTU，加入体积为足以溶解上述溶质的NMP溶解，完全溶解后加入相当于氨基树脂用量3‑20倍量的DIPEA至反应器中反应1‑20h，反应结束后量取相当于氨基树脂用量5‑100倍量的乙酸酐、相当于氨基树脂用量5‑100倍量的吡啶混合于NMP中，加入反应器中反应1‑10h，洗涤得Fmoc‑L‑Val‑氨基树脂；2) 将体积比1:4的哌啶NMP溶液加至Fmoc‑L‑Val‑氨基树脂中进行脱保护反应；加入相当于氨基树脂用量1.5‑10倍量的Fmoc‑L‑Pro‑OH、1.5‑10倍量的HOBt、1.5‑10倍量的HBTU，加入体积为足以溶解上述溶质的NMP溶解，完全溶解后加入相当于氨基树脂用量3‑20倍量的DIPEA混合均匀后加入反应器中反应1‑20h；反应结束后洗涤产物，再按美那诺坦的多肽序列逐个偶联氨基酸，各氨基酸及偶联试剂的用量同上，依次完成Fmoc‑L‑Lys(Boc)‑OH、Fmoc‑Gly‑OH、Fmoc‑L‑Trp(Boc)‑OH、Fmoc‑L‑Arg(Pbf)‑OH、Fmoc‑D‑Phe‑OH、Fmoc‑L‑His(Trt)‑OH、Fmoc‑L‑Glu(OtBu)‑OH、Fmoc‑L‑Nle‑OH、Fmoc‑L‑Ser(tBu)‑OH、Fmoc‑L‑Tyr(tBu)‑OH、Fmoc‑L‑Ser(tBu)‑OH的偶联，得到N端为游离氨基的含侧链保护基团的美那诺坦‑氨基树脂；3) 将N端为游离氨基的含侧链保护基团的美那诺坦‑氨基树脂经洗涤后投入反应器，相当于氨基树脂用量5‑100倍量的乙酸酐、相当于氨基树脂用量5‑100倍量的吡啶混合于等体积的NMP中，加入反应器中反应1‑10h，得到含侧链保护基团的美那诺坦‑氨基树脂；4) 向含侧链保护基团的美那诺坦‑氨基树脂中加入体积比为82.5/5/5/5/2.5的TFA/thioanisole/H₂O/phenol/EDT的裂解试剂，冰浴反应0.1‑1h后，室温下继续搅拌反应1‑10h，然后抽滤；抽滤后将裂解试剂滤液利用旋转蒸发和/或N₂气吹至无TFA溢出，加入3‑100倍量的沉淀试剂静置；离心分离沉淀的粗肽，粗肽经纯化、冻干得美那诺坦。