SecB介导的翻译后靶向途径的功能构建及其应用

摘要

本发明涉及SecB介导的翻译后靶向途径的功能构建及其应用。具体而言，本申请涉及构建嵌合SecA蛋白、在细菌表达该嵌合SecA蛋白和SecB蛋白而增加secB基因缺失细菌分泌蛋白效率的方法、在secB基因缺失细菌中构建SecB介导的翻译后靶向途径的方法以及提高secB基因缺失细菌蛋白质分泌能力的方法。此外，本申请还涉及相关的氨基酸序列和核苷酸序列，表达载体，以及含有所述氨基酸序列、核苷酸序列和/或表达载体的系统。

主权项

一种在细菌中构建SecB介导的翻译后靶向途径的方法，其特征在于，该方法包括：在该细菌中共表达嵌合SecA蛋白和SecB蛋白，从而在该细菌中构建SecB介导的翻译后靶向途径；其中，所述嵌合SecA蛋白选自SEQ ID NO:29或31所示的蛋白，所述SecB蛋白为大肠杆菌SecB蛋白；或所述嵌合SecA蛋白由枯草芽胞杆菌SecA蛋白第1位至第809位氨基酸和流感嗜血杆菌SecA蛋白第867位至第901位氨基酸融合而得，所述SecB蛋白选自大肠杆菌SecB蛋白或流感嗜血杆菌SecB蛋白；所述嵌合SecA蛋白能结合所述SecB蛋白；所述细菌为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis），天然存在secA基因但天然缺失secB基因；以及所述在该细菌中共表达嵌合SecA蛋白和SecB蛋白包括：构建含嵌合secA基因的表达载体和含secB基因的表达载体，其中，所述嵌合secA基因编码所述嵌合SecA蛋白，所述secB基因编码所述SecB蛋白；和用所述含嵌合secA基因的表达载体和含secB基因的表达载体转化该细菌，从而在该细菌中共表达所述嵌合SecA蛋白和SecB蛋白。