含鼠lgG2a Fc标签的真核表达载体及其构建方法

摘要

本发明公开了一种含鼠lgG2a Fc标签的真核表达载体及其构建方法，构建方法为：将mIgG-Fc序列和pMD18-T载体连接，转化大肠杆菌，筛选得到重组载体mIgG-Fc-pMD18-T；将重组载体mIgG-Fc-pMD18-T和pcDNA3.1+质粒分别用Not I和Xba I进行双酶切，将分离纯化后的酶切产物进行连接，转化大肠杆菌，筛选获得含鼠lgG2a Fc标签的真核表达载体。该载体可以在哺乳动物细胞中表达目的蛋白，并通过小鼠IgG Fc作为标签，用抗小鼠IgG Fc的抗体即可检测，表达的蛋白液可以用ProteinA或Protein G的亲和柱纯化，以用于后续蛋白质活性的鉴定。

主权项

一种含鼠lgG2a Fc标签的真核表达载体的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将mIgG‑Fc序列和pMD18‑T载体连接，转化大肠杆菌，筛选得到重组载体mIgG‑Fc‑pMD 18‑T；(2)将重组载体mIgG‑Fc‑pMD18‑T和pcDNA3.1+质粒分别用Not I和Xba I进行双酶切，将分离纯化后的酶切产物进行连接，转化大肠杆菌，筛选获得含鼠lgG2a Fc标签的真核表达载体。