腹水型抗体的纯化方法

摘要

一种腹水型抗体的纯化方法，包括如下步骤：在4℃将小鼠腹水离心，取清液；在清液中加入磷酸盐缓冲液进行稀释，再搅拌加入饱和的硫酸铵溶液，直至饱和度达到45%~50%，静置析晶后，经离心，得到沉淀物；在沉淀物中加入磷酸盐缓冲液溶解，得到的溶液经过0.45微米滤膜，使用葡聚糖凝胶G25脱盐柱脱盐，使用磷酸盐缓冲液进行平衡和洗脱，收集蛋白溶液；将蛋白溶液上样至Protein A/G亲和柱，再用磷酸盐缓冲液将杂蛋白从亲和柱上洗脱，然后用甘氨酸-盐酸溶液将抗体从亲和柱上洗脱，得到抗体溶液。上述腹水型抗体的纯化方法大幅度的提高了抗体的纯度，使得抗体的纯度大于90%。

主权项

一种腹水型抗体的纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一：在4℃将小鼠腹水离心，取清液；步骤二：在所述清液中加入磷酸盐缓冲液进行稀释，再搅拌加入饱和的硫酸铵溶液，直至饱和度达到45%~50%，静置析晶后，经离心，得到沉淀物；步骤三：在所述沉淀物中加入磷酸盐缓冲液溶解，得到的溶液经0.45微米滤膜过滤，使用葡聚糖凝胶G25脱盐柱脱盐，使用磷酸盐缓冲液进行平衡和洗脱，收集蛋白溶液；及步骤四：将所述蛋白溶液上样至Protein A/G亲和柱上，并用磷酸盐缓冲液将杂蛋白从所述Protein A/G亲和柱上洗脱，然后用甘氨酸‑盐酸溶液将抗体从所述Protein A/G亲和柱上洗脱，得到抗体溶液。