家蝇对拟除虫菊酯类杀虫剂靶标抗性的分子检测方法

摘要

本发明涉及家蝇对拟除虫菊酯类杀虫剂靶标抗性的分子检测方法。采用根据家蝇钠离子通道基因的敏感与抗性基因型设计的特异性引物，以单头家蝇的基因组DNA为模板，进行钠离子通道基因片段的PCR扩增，根据对PCR产物的电泳检测，来区分家蝇个体的基因型，检测抗性基因型频率。本发明涵盖家蝇钠离子通道的1014F，1014H，918T三种抗性点突变的检测方法。该方法经济、快速、高通量、准确性高。

主权项

一种家蝇对拟除虫菊酯类杀虫剂靶标抗性的分子检测方法，包含下列步骤：（1）提取单头家蝇基因组DNA；（2）对家蝇钠离子通道基因1014位点抗性相关变异进行分子检测；（3）对家蝇钠离子通道基因918位点抗性相关变异进行分子检测;其中所述家蝇钠离子通道基因序列如SEQ ID NO:10，SEQ ID NO:11，SEQ ID NO:12，SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14所示;其中，使用PCR方法对家蝇钠离子通道基因1014位点和918位点抗性相关变异进行分子检测;其中，步骤（2）中使用了下列5种PCR引物：PF：正向通用外引物，序列如SEQ ID NO:1所示；PR：反向通用外引物，序列如SEQ ID NO:2所示；PL：1014L敏感基因特异性引物，序列如SEQ ID NO:3所示；PF：1014F抗性基因型特异性引物，序列如SEQ ID NO:4所示；PH：1014H抗性基因型特异性引物，序列如SEQ ID NO:5所示;其中，步骤（3）中使用了下列4种PCR引物：S1:序列如SEQ ID NO:6所示；S2:序列如SEQ ID NO:7所示；S3:序列如SEQ ID NO:8所示；S4:序列如SEQ ID NO:9所示。