发明名称 |
一种制备高稳定性的非对称二甲基精氨酸水解酶的方法 |
摘要 |
本发明属于蛋白纯化技术领域,具体为一种制备高稳定性的非对称二甲基精氨酸水解酶的方法。它将非对称二甲基精氨酸水解酶装入阴离子交换色谱柱,注入该柱至少一种三羟甲基氨基甲烷缓冲液,该缓冲液中的阴离子浓度高于色谱柱的阴离子浓度,由此去除杂蛋白并从该柱洗脱纯化的非对称二甲基精氨酸水解酶。在实施案例中,通过4个离子浓度的缓冲液,阴离子浓度大约在0mM-500mM之间的,因此形成离子浓度梯度,清除杂质,获得常温下长期稳定的高纯度非对称二甲基精氨酸水解酶。 |
申请公布号 |
CN103849611A |
申请公布日期 |
2014.06.11 |
申请号 |
CN201210516495.4 |
申请日期 |
2012.12.04 |
申请人 |
绍兴科锐捷生物科技有限公司;北大工学院绍兴技术研究院 |
发明人 |
王学忠;胡广;赵志敬 |
分类号 |
C12N9/78(2006.01)I |
主分类号 |
C12N9/78(2006.01)I |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
一种制备高稳定性的非对称二甲基精氨酸水解酶的方法,包括以下步骤:a)用一种三羟甲基氨基甲烷缓冲液将非对称二甲基精氨酸水解酶装入一种阴离子交换色谱柱,使该柱处于一定pH和电导率;b)向该柱中注入至少一种三羟甲基氨基甲烷缓冲液,所述缓冲液的阴离子浓度高于色谱柱的离子浓度,由此,纯化的非对称二甲基精氨酸水解酶从该柱洗脱。 |
地址 |
312030 浙江省绍兴市绍兴县云集路1152号 |