| 发明名称 | 一种真菌菌丝总DNA的提取方法 | ||
| 摘要 | 本发明属于真菌的分子生物学研究领域，具体涉及一种真菌菌丝总DNA的提取方法，具有免液氮研磨又能较为彻底打破细胞壁提取真菌菌丝总DNA的优点，其步骤如下：（1）收集真菌菌丝体；（2）置于DNA提取液中，捣碎；（3）在-80℃的低温环境与65℃水浴环境中反复冻融2～3次；（4）加入蛋白酶K和溶菌酶处理；（5）去酶及纯化DNA。该处理方法简单，所需试剂常见；采用反复冻融、捣碎的方式使样品可免于使用液氮研磨，便于不易获得液氮的地方使用；未使用研钵防止了交叉污染；也避免使用苯酚、β-巯基乙醇等有毒试剂；整个提取过程温和，提取真菌菌丝总DNA质量高，可进行ITS序列PCR扩增及测序等后续分子生物学研究。 | ||
| 申请公布号 | CN103820434A | 申请公布日期 | 2014.05.28 |
| 申请号 | CN201410102771.1 | 申请日期 | 2014.03.19 |
| 申请人 | 四川省农业科学院土壤肥料研究所;成都市农林科学院;四川省技术创新促进会 | 发明人 | 李小林;郑林用;李昕竺;曾先富;黄羽佳 |
| 分类号 | C12N15/10(2006.01)I;C12R1/645(2006.01)N | 主分类号 | C12N15/10(2006.01)I |
| 代理机构 | 成都虹桥专利事务所(普通合伙) 51124 | 代理人 | 高芸;梁鑫 |
| 主权项 | 真菌菌丝总DNA的提取方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）收集真菌菌丝体；（2）真菌菌丝体置于DNA提取液中，捣碎真菌菌丝体；（3）在‑70℃至‑85℃的低温环境与60‑65℃水浴环境中反复冻融2～3次；（4）加入蛋白酶K和溶菌酶处理；（5）去酶及纯化DNA。 | ||
| 地址 | 610066 四川省成都市锦江区外东狮子山路2区四川省农业科学院土壤肥料研究所 | ||