纯化FC-融合蛋白的方法

摘要

本发明主要涉及纯化在真核表达系统中产生的Fc融合蛋白的方法。更具体地，本发明提供了稳定的和可扩展的下游纯化方法，其适合在用于人施用的TNFR:Fc的制造中使用，所述方法包括优化的蛋白A亲和层析步骤和都以结合和洗脱模式操作的两个离子交换层析步骤。

主权项

从样品中除去一种或多种杂质，纯化Fc融合蛋白的方法，其包括以下步骤：a) 提供包含在真核表达系统中产生的Fc融合蛋白的样品；b) 使存在于样品中的Fc融合蛋白结合到蛋白A亲和层析树脂；c) 从蛋白A树脂洗脱Fc融合蛋白，其中洗脱的产品提供第二样品，任选地称为蛋白A产品(PAP)；d) 使PAP结合到阳离子交换(CEX)层析树脂；e) 从CEX树脂洗脱第二样品，其中洗脱的产品提供第三样品，任选地称为CEX产品(CEXP)；f) 使CEXP结合到阴离子交换(AEX)层析树脂；和g) 从AEX树脂洗脱第三样品，其中洗脱的产品提供纯化的Fc融合蛋白组合物。