固定化多酚氧化酶动态连续氧化制备茶黄素的方法

摘要

本发明公开了一种以茶多酚为原料、固定化多酚氧化酶动态连续氧化制备茶黄素的方法。目前，红茶茶汤中茶黄素的含量仅占红茶干物质的0.3-1.5％，且直接利用红茶提取得率非常低。现行茶黄素的合成制备不能实现连续动态制备，仅限于实验室的制备，导致获得茶黄素的成本非常之高，限制了茶黄素在医药保健上的应用。本发明以茶多酚为底物，固定化多酚氧化酶为催化媒介，控制反应温度，在填充床反应器上实现底物与氧气连续进入，完成茶多酚的氧化、聚合形成茶黄素类物质并由恒流泵连续泵出。本发明在生物反应器上重复利用固定化多酚氧化酶实现了茶黄素的连续动态制备，得到一定含量的茶黄素混合液，为茶黄素的工业化制备提供基础。

主权项

固定化多酚氧化酶动态连续氧化制备茶黄素的方法，其具体步骤如下：1）以树脂作为载体，采用吸附交联法将多酚氧化酶固定在树脂上，制得固定化多酚氧化酶；2）将茶多酚用溶剂溶解配制成底物料液，所述底物料液的浓度控制在5‑15mg/mL，茶多酚中的儿茶素总量≥30%；3）将固定化多酚氧化酶固定于填充床反应器中形成床体，从填充反应器的底部将氧气与底物料液同时通入床体中，进行茶多酚的动态连续氧化，使儿茶素聚合形成茶黄素；4）通过恒流泵从填充床反应器上端将反应生成液连续泵出，得到茶黄素混合液；5）对茶黄素混合液进行浓缩、干燥，得到粗茶黄素产品；所述的多酚氧化酶为真菌漆酶、植物果实多酚氧化酶、茶叶多酚氧化酶或酪氨酸酶；步骤3）氧化反应的条件为：当柱床体积为100mL时，填充床反应器内的反应温度控制在10‑50℃，氧气流量控制在10‑100mL/min，底物料液流速控制在1.0‑5mL/min，反应生成液泵出的流速为底物料液流速的1‑1.2倍。