生物酶法生产蚕蛹油并提取α-亚麻酸的方法

摘要

本发明涉及一种生物酶法生产蚕蛹油并提取α-亚麻酸的方法，包括下列步骤：（1）烘干粉碎：蚕蛹经烘干粉碎过筛得蚕蛹粉；（2）水相酶解：按照料水质量比1:4~7将蚕蛹粉与水混合均匀，然后分两步进行酶解：首先，按照蚕蛹粉质量1.0~2.0%的比例加入胃蛋白酶，于30~40℃酶解2~4h，酶解过程中控制pH值为1.0~2.0，然后按照蚕蛹粉质量1.0~2.0%的比例加入木瓜蛋白酶，于55~65℃酶解2~4h，酶解过程中控制pH为6.0~7.0，酶解完成后酶解液加热至80~85℃灭酶；（3）离心、油水分离得到蚕蛹精油；（4）蚕蛹油脂肪酸制备；（5）尿素包埋：获得纯度70~75%的α-亚麻酸。本方法率先将生物酶法及尿素包埋等方法应用于蚕蛹细胞上，具有工艺简单、安全环保、成本低廉、所得蚕蛹油和α-亚麻酸质量优的优点。

主权项

生物酶法生产蚕蛹油并提取α‑亚麻酸的方法，其特征在于：所述方法包括下列步骤：（1）烘干粉碎：蚕蛹经烘干粉碎过筛后，得到蚕蛹粉备用；（2）水相酶解：按照料水质量比1:4~7将蚕蛹粉与水混合均匀，然后分两步进行酶解：首先，按照蚕蛹粉质量1.0~2.0%的比例加入胃蛋白酶，于30~40℃酶解2~4h，酶解过程中控制pH值为1.0~2.0，然后按照蚕蛹粉质量1.0~2.0%的比例加入木瓜蛋白酶，于55~65℃酶解2~4h，酶解过程中控制pH为6.0~7.0，酶解完成后酶解液加热至80~85℃灭酶；（3）离心、油水分离：将酶解液离心分离得到残渣和上清液，上清液加热至50~60℃并静置进行物理破乳，然后将上清液进一步通过离心分离得到蚕蛹毛油和蚕蛹多肽液；（4）蚕蛹毛油精制：向蚕蛹毛油中加入2~4倍蚕蛹毛油体积的稀碱溶液，于30~40℃条件下搅拌1~3h，静置一段时间，待油水分离后，去除稀碱液，得到蚕蛹精油；（5）蚕蛹油脂肪酸制备：蚕蛹精油与1~1.2mol/L的氢氧化钠溶液按体积比1:3~5混合，于60~70℃小搅拌反应2~4h，静置冷却至常温，加水至澄清透明，调pH至2~3，加入蚕蛹精油3倍体积的石油醚或乙醚萃取，静置后收集醚层，水洗至中性，醚层经脱水后于40~50℃回收石油醚或乙醚，获得蚕蛹脂肪酸；（6）尿素包埋：将尿素与甲醇以体积比1:2~3混合，在60~70℃的条件下搅拌至充分溶解，加入适量的蚕蛹脂肪酸，尿素:甲醇:蚕蛹脂肪酸的体积比为1:2~3:0.6~1.0，搅拌2~3h混匀，然后冷却至室温，在‑15~‑30℃条件下静置包合20~35h，然后迅速减压抽滤，滤液调pH至2.0~3.0，用3~5倍滤液体积的石油醚或乙醚萃取，取醚层水洗至中性，经脱水后于40~50℃回收石油醚或乙醚，得到纯度70~75%的α‑亚麻酸。