发明名称 一种新生大鼠海马神经元原代培养的培养液及其制备方法和应用
摘要 本发明公开了一种新生大鼠海马神经元原代培养的培养液及原代培养大鼠海马神经元的方法,该培养液是在基础培养液Neurobasalmedium中加入1、6二磷酸果糖、果糖和营养添加剂。原代培养新生大鼠海马神经元具有以下步骤:①制备海马神经元培养液;②取材、消化;③制备单细胞悬液;④接种、培养。本发明原代培养大鼠培养海马神经元的方法简便,采用本发明培养液能够获得生长状态良好、纯度较高的海马神经元,具有重要的应用价值和经济价值。
申请公布号 CN102533654B 申请公布日期 2014.01.29
申请号 CN201210023408.1 申请日期 2012.02.02
申请人 温州医学院附属第二医院 发明人 孙晶
分类号 C12N5/0793(2010.01)I 主分类号 C12N5/0793(2010.01)I
代理机构 北京汇泽知识产权代理有限公司 11228 代理人 武君
主权项 1.一种新生大鼠海马神经元原代培养的培养液,其特征在于:该培养液为在基础培养液中加入1、6-二磷酸果糖、果糖和营养添加剂;其中,每升基础培养液中加入1-10mmol的1、6-二磷酸果糖、2-20mmol的果糖,其中所述基础培养液为<img file="FDA0000366491730000012.GIF" wi="281" he="71" />Medium,其中,所述1、6-二磷酸果糖与果糖摩尔浓度比为1∶2, 每升基础培养液中加入如下组分的营养添加剂:10-20μg碱性成纤维细胞生长因子,6-15mg ATP,30-50U辅酶A,0.1-1g两性霉素B,5-50mg胰岛素,0.42-0.83mg硫酸亚铁,5-50mg人转铁收白和20-60mg维生素混合液, 所述每升基础培养液中,维生素混合液由如下含量的各组分构成, <img file="FDA0000366491730000011.GIF" wi="581" he="948" />
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