一种从牡丹花中提取总黄酮的方法

摘要

一种从牡丹花中提取总黄酮的方法。本发明属于植物生物技术领域，具体涉及一种从牡丹花中提取牡丹精油的方法。包括采摘、制备复合酶液、超声波处理、离心处理和减压蒸馏。先在温度为35℃的条件下对牡丹花酶处理20min，可以使牡丹花细胞壁及其间质结构产生局部的疏松、膨胀、崩溃等变化；之后对牡丹花施加短时间的超声波处理，超声波在液体的内部产生强的冲击波和微射流，这种强大的冲击流能够有效的减小、消除溶剂与水相之间的阻滞层，从而加大了传质速率，此外，冲击流对细胞组织产生一种物理剪切力，使之变形、破裂，并释放出内含物，在细胞壁及其间质结构产生局部的疏松、膨胀、这大大加速了细胞内黄酮类化合物的萃取过程，起到了事半功倍的效果。

主权项

一种从牡丹花中提取总黄酮的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、采摘成熟、无病害的牡丹花，将牡丹花置于温度为25～30℃的烘箱中鼓风干燥，之后取出牡丹花并粉碎至40目，备用；步骤二、将质量浓度为0.2mg/mL的纤维素酶水溶液和质量浓度为0.1mg/mL的果胶酶水溶液等体积混合，向混合液中加入质量百分比浓度为2%的醋酸溶液，直至混合液pH值达到5.0，将混合液搅拌均匀后静置10～15min，得到复合酶液；步骤三、将步骤一得到的牡丹花放入三角瓶中，在三角瓶中加入步骤二制备的复合酶液，复合酶液与牡丹花加入量的比例为45:1，其中复合酶液以毫升计，牡丹花以克计，之后先将带有牡丹花的三角瓶放置到温度为35℃的条件下静置20min，然后保持该温度，并三角瓶施加频率为22 kHz的超声波处理5min，最后将三角瓶转移到温度为40℃的条件下静置40min，备用；步骤四、向静置后的三角瓶中加入质量百分比浓度为95%的乙醇回流提取1h，乙醇加入量为三角瓶中溶液的5倍，之后将溶液转移到转速为10000r/min的离心机中离心15min，得到上清液Ⅰ，向离心后的残渣中加入质量百分比浓度为60%的乙醇回流提取0.5h，之后转移到转速为10000r/min的离心机中离心，得到上清液Ⅱ；步骤五、合并上清液Ⅰ和上清液Ⅱ后，转入压强为‑0.1MPA，温度为55~65℃的旋转蒸发仪中减压浓缩，浓缩至温度为55℃的条件下相对密度为1.20g/mL。