发明名称 |
一种α<sub>1</sub>-AR亚型选择性拮抗剂的高通量筛选细胞模型及其构建方法与应用 |
摘要 |
本发明具体公开了一种α1-AR亚型选择性拮抗剂的高通量筛选细胞模型及其构建方法与应用。所述构建方法是将α1-AR三种亚型(α1A,α1B,α1D)的真核表达质粒、报告基因和内参质粒共转染宿主细胞,建立瞬转细胞模型,向细胞模型中先后加入待筛选拮抗剂和激动剂,共培养一段时间后,细胞裂解,裂解产物进行荧光素酶活性测定,测定报告基因和内参的相对表达量,以此来评价该药物对α1-AR三种亚型:α1A、α1B和α1D的抑制活性。该方法通过模型稳定性、波动性考察和模型验证。可用于α1-AR亚型选择性拮抗剂的高通量筛选,进一步可用于筛选潜在治疗良性前列腺增生药物。 |
申请公布号 |
CN103484498A |
申请公布日期 |
2014.01.01 |
申请号 |
CN201310397254.7 |
申请日期 |
2013.09.04 |
申请人 |
广州医科大学 |
发明人 |
袁牧;许芳;黎枭;徐静仪;朱着;何雪兰;朱柳;陈洪;黄碧云 |
分类号 |
C12N15/85(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;C12Q1/02(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/85(2006.01)I |
代理机构 |
广州粤高专利商标代理有限公司 44102 |
代理人 |
谢敏楠 |
主权项 |
一种α1‑AR亚型选择性拮抗剂高通量筛选细胞模型,其特征在于,其构建方法为:将α1‑AR三种亚型α1A、α1B和α1D的真核表达质粒、报告基因和内参质粒共转染宿主细胞,建立瞬转细胞模型;所述报告基因采用G蛋白偶联受体的响应元件CRE、NFAT‑RE、 SRE、AP‑1或NF‑кB中的任意一种与荧光素酶、β‑半乳糖苷酶或碱性磷酸酶报告基因中的任意一种共同构建于一个载体上制备得到;所述内参质粒为含有内参SV40的质粒。 |
地址 |
510182 广东省广州市东风西路195号 |