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一种基于氯过氧化物酶法检测亚硝酸盐含量的方法，其特征在于由下述步骤组成：（1）测定氯过氧化物酶的氧化活性将5μL8μmol/L的氯过氧化物酶水溶液、200μL2mmol/L的吲哚水溶液、100μL3mmol/L的双氧水溶液、695μL pH值为5的柠檬酸‑柠檬酸钠缓冲液加入1mL比色皿中，用紫外可见分光光度计在波长270nm处测定30s内其吸光度变化量，记为△A1270nm；（2）测定NO2‑存在时氯过氧化物酶的相对氧化活性将5μL8μmol/L的氯过氧化物酶水溶液、200μL2mmol/L的吲哚水溶液、100μL3mmol/L的双氧水溶液加入1mL比色皿中，再加入1mmol/L的NaNO2水溶液和pH值为5的柠檬酸‑柠檬酸钠缓冲液，保持混合液的总体积为1mL，混合液中NO2‑离子的浓度为0.005～0.055mmol/L，用紫外可见分光光度计在波长270nm处测定30s内其吸光度变化量，记为△A2270nm，按下述公式（1）计算氯过氧化物酶的相对氧化活性氯过氧化物酶的相对氧化活性=△A2270nm/△A1270nm （1）（3）确定工作曲线及方程以NO2‑的浓度为横坐标，氯过氧化物酶的相对氧化活性为纵坐标，由计算机绘制工作曲线，并得出工作曲线的线性回归方程为y=1.0364+55.02x，式中y是氯过氧化物酶的相对氧化活性，x是NO2‑的浓度，相关系数为0.9975；（4）测定样品中亚硝酸盐含量将5μL8μmol/L的氯过氧化物酶水溶液、200μL2mmol/L的吲哚水溶液、100μL3mmol/L的双氧水溶液加入1mL比色皿中，再加入10～20μL样品浸出液和pH值为5的柠檬酸‑柠檬酸钠缓冲液，保持混合液的总体积为1mL，用紫外可见分光光度计在波长270nm处测定30s内其吸光度变化量，记为△A2270nm，按公式（1）计算氯过氧化物酶的相对氧化活性，将此值代入线性回归方程，计算样品中亚硝酸盐的含量。 |
