| 发明名称 | 一种基因定点突变的构建方法 | ||
| 摘要 | 本发明公开一种基因定点突变的构建方法，确定大鼠目标基因组序列中可被人工改造CRISPR-Cas系统所识别的靶序列；构建能够识别并引导CAS蛋白至目标基因靶序列的引导RNA序列(guide RNA，gRNA)；将上述gRNA序列与CAS蛋白编码核酸序列或者gRNA序列和体外表达的CAS蛋白混合物导入大鼠胚胎细胞。本发明无需构建同源重组打靶载体、无需进行ES打靶细胞筛选，突变体比例高，操作简便，可实现多位点同时敲除，能够大幅度降低实验成本和缩短实验周期。 | ||
| 申请公布号 | CN103388006A | 申请公布日期 | 2013.11.13 |
| 申请号 | CN201310320603.5 | 申请日期 | 2013.07.26 |
| 申请人 | 华东师范大学 | 发明人 | 李大力;刘明耀;邱中伟 |
| 分类号 | C12N15/85(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I | 主分类号 | C12N15/85(2006.01)I |
| 代理机构 | 上海麦其知识产权代理事务所(普通合伙) 31257 | 代理人 | 董红曼 |
| 主权项 | 一种基因定点突变的构建方法，其特征在于，包括：(1)在大鼠目标基因组序列中确定CRISPR‑Cas系统所靶向的靶序列；(2)设计、构建能够识别并引导CAS蛋白至目标基因靶序列的gRNA核酸序列；(3)将所述gRNA核酸序列与编码CAS蛋白的核酸序列或蛋白质导入所述大鼠胚胎细胞内。 | ||
| 地址 | 200062 上海市普陀区中山北路3663号 | ||