发明名称 发酵制备中纯度赖氨酸硫酸盐的方法
摘要 本发明提供了发酵制备含L-赖氨酸硫酸盐的产品的方法,其包括向产L-赖氨酸的菌导入一个被认为与赖氨酸代谢无关的基因。另外,本发明还提供了所述方法生产的产品,该产品相对于现有含L-赖氨酸硫酸盐的产品,能够显著提高抗吸湿性,从而适宜长期保存。
申请公布号 CN102911976B 申请公布日期 2013.10.16
申请号 CN201210440081.8 申请日期 2012.11.07
申请人 宁夏伊品生物科技股份有限公司 发明人 马吉银;陈崇安;孟刚
分类号 C12P19/00(2006.01)I;C07H3/06(2006.01)I;C07H1/08(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N 主分类号 C12P19/00(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 发酵制备含L‑赖氨酸硫酸盐的产品的方法,其包括: (1)将编码氨基酸序列如SEQ ID No:l所示的蛋白的多核苷酸克隆入pET‑20b(+)质粒,然后将该重组质粒导入大肠杆菌菌株W3110(tryA)/pCABD2中,获得产L‑赖氨酸的菌株W3110(tryA)/pCABD2‑sigma; (2)在发酵条件下液体培养步骤(1)获得的菌,并收集培养的上清液;所述发酵条件为:将菌株接入液体LB培养基中振荡培养至OD500达到0.35,以5%的接种量接入赖氨酸发酵培养基中以36℃振荡培养72小时,每升赖氨酸发酵培养基配方为:100g葡萄糖,60g (NH4)2SO4,50g CaCO3,35mL蛋白胨‑B,1g KH2PO4,400mg MgSO4·7H2O,200mg L‑甲硫氨酸,10mg FeSO4·7H2O,8.1mg MnSO4·4H2O,300μg生物素和200μg维生素B1,用Tris‑HCl调节至pH 7;所述上清液中包含如下重量配比的氨基酸:赖氨酸51~55份,天冬氨酸1.2~1.8份,苏氨酸0.8~1.1份,丝氨酸0.4~0.65份,谷氨酸2~3份,甘氨酸0.75~1.1份,丙氨酸1.2~1.6份,缬氨酸0.75~1.1份,甲硫氨酸0.3~0.5份,异亮氨酸0.45~0.75份,亮氨酸1~1.5份,酪氨酸0.5~0.8份,苯丙氨酸0.5~0.8份,组氨酸0.8~1.2份,精氨酸0.9~1.3份; (3)向步骤(2)获得的上清液中加入硫酸并浓缩,以雾状喷入流化床干燥机内造粒,并将颗粒干燥至含水率小于3%。
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