灯盏细辛酚有关物质的提取分离方法

摘要

本发明提供一种灯盏细辛酚有关物质的提取分离方法，包括取灯盏细辛酚，加乙醇溶液溶解，制成供试品；将供试品用大孔吸附树脂进行柱层析，分别得到A组分和B组分；再分别采用高压液相色谱仪进行分离，得到六个化合物，分别为灯盏甲素、芹菜素、3,4-二咖啡酰基奎宁酸、1,3,5-三咖啡酰基奎宁酸、3,4,5-三咖啡酰基奎宁酸、飞蓬酯乙乙酯。所述六个化合物在灯盏细辛酚中的质量百分比含量分别为：灯盏甲素1.51%以下、芹菜素1.30%以下、3,4-二咖啡酰基奎宁酸0.95%以下、1,3,5-三咖啡酰基奎宁酸0.55%以下、3,4,5-三咖啡酰基奎宁酸0.33%以下、飞蓬酯乙乙酯0.42%以下。

主权项

一种灯盏细辛酚有关物质的提取分离方法，所述提取分离方法包括以下步骤：1）提取工艺：取灯盏细辛酚，加乙醇溶液溶解，制成供试品；2）分离工艺：将步骤1）中制得的供试品进行大孔吸附树脂柱层析，先用水洗脱，再用乙醇溶液洗脱，然后再用乙酸乙酯对乙醇溶液洗脱液萃取，分别得到下层的乙醇提取液即A组分和上层的乙酸乙酯萃取液即B组分；其中，所述乙醇溶液的浓度为50体积%；3）再将步骤2）制得的A组分和B组分分别通过高压液相色谱仪分离，其中A组分得到1、2号化合物，B组分得到3、4、5、6号化合物；所述分离通过包括以下步骤的方法进行：将步骤2）中得到的A组分用盐酸调节pH至有沉淀析出，将沉淀滤出，并用四氢呋喃‑甲醇溶液溶解后，再通过高压液相色谱仪进行分离，其中以乙醇‑水为流动相，梯度洗脱，得到1、2号化合物；及将步骤2）中得到的B组分减压蒸干后的固体物，用丙酮溶解后，再通过高压液相色谱仪进行分离，其中以石油醚‑丙酮为流动相，梯度洗脱，得到3、4、5、6号化合物；4）利用核磁共振氢谱和碳谱鉴定1‑6号化合物，所述1号化合物为灯盏甲素；所述2号化合物为芹菜素；所述3号化合物为3,4‑二咖啡酰基奎宁酸；所述4号化合物为1,3,5‑三咖啡酰基奎宁酸；所述5号化合物为3,4,5‑三咖啡酰基奎宁酸；所述6号化合物为飞蓬酯乙乙酯；5）根据已建立的灯盏细辛酚的指纹图谱，计算步骤4）鉴定的所述六个化合物的峰分别占灯盏细辛酚的指纹图谱总峰面积的百分比，从而分别得出所述六个化合物在灯盏细辛酚中质量百分比分别为，灯盏甲素：1.51%以下、芹菜素：1.30%以下、3,4‑二咖啡酰基奎宁酸：0.95%以下、1,3,5‑三咖啡酰基奎宁酸：0.55%以下、3,4,5‑三咖啡酰基奎宁酸：0.33%以下、飞蓬酯乙乙酯：0.42%以下。