一种利用Vero传代细胞制备禽流感病毒及其灭活疫苗的方法

摘要

本发明公开了一种利用Vero传代细胞制备禽流感病毒及其灭活疫苗的方法，本发明方法采用Vero传代细胞代替鸡胚培养流感病毒解决了鸡胚蛋白遗留物和外源病毒污染的问题，且培养的病毒免疫原性更稳定。另一方面为了避免胰蛋白酶在维持液中被抑制剂作用后失活而影响HA的裂解，本发明采用壳聚糖对胰酶进行包被后，加入到细胞维持液中，使胰酶在维持液中缓慢释放，克服了在病毒繁殖过程中由于胰酶的失活而影响血凝素的裂解。也避免了多次加入胰酶而对细胞造成污染的几率。采用本发明方法培养出的病毒滴度高，稳定性好，适合进行大规模的疫苗生产。

主权项

一种利用Vero传代细胞生产禽流感病毒液的方法，其特征在于首先采用壳聚糖对胰酶进行包被，得到包埋胰酶的壳聚糖纳米粒；然后将包埋胰酶的壳聚糖纳米粒加入到Vero传代细胞的细胞培养液中，使其终浓度为6μg/ml，继而接种禽流感病毒Vero细胞适应株进行病毒培养，收获病毒液，即得。