发明名称 一种基于PCR技术的花椰菜遗传纯度快速检测方法
摘要 本发明公开了一种基于PCR技术的花椰菜遗传纯度快速检测方法,本发明以花椰菜杂交种‘东方白雪100天“为研究对象,开展分子标记的筛选,鉴定出杂种中能够同时产生父、母本特异条带标记的特异引物组合SREM8-1/SRodd58,幼苗叶片的基因组DNA。本发明引物的应用,具有准确性高、结果稳定、不受环境条件及发育时期的影响、统计简便等优点,可以简单、快速、准确地检测花椰菜杂交品种‘东方白雪100天’的种子遗传纯度,有利于花椰菜种子高效准确的质量控制,加快了花椰菜商品种子的质量检测进程。
申请公布号 CN102643913B 申请公布日期 2013.08.07
申请号 CN201210110250.1 申请日期 2012.04.16
申请人 温州市农业科学研究院 发明人 王燕;徐坚;许园园;郑岳忠
分类号 C12Q1/68(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 温州瓯越专利代理有限公司 33211 代理人 张瑜生
主权项 一种基于PCR技术的花椰菜遗传纯度快速检测方法,其特征在于包括以下步骤:(1)提取花椰菜杂交种“东方白雪100天”幼苗叶片的基因组DNA;(2)采用特异引物组合SREM8‑1/ SRodd58:正向引物SREM8‑1:GACTGCGTACGAATTCAC和反向引物SRodd58:TTCTAGGTAATCCAACAACA,以基因组DNA为模板,进行PCR扩增;(3)将扩增后的DNA片段,进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测;(4)对电泳结果进行分析,将同时具有母本特异性标记条带和父本特异性标记条带的单株判定为真正的杂交种,缺少其中任意一个条带记为假杂种,计算种子遗传纯度,其中:特异引物组合SREM8‑1/ SRodd58产生大小为110bp母本特异性标记条带,产生大小为80bp父本特异性标记条带。
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