一种检测小鼠痘病毒的荧光定量PCR试剂盒及应用

摘要

本发明公开了一种检测小鼠痘病毒的荧光定量PCR试剂盒及应用，该试剂盒含有：a)DNA提取液、b)引物、c)标准阳性模板、d)SYBRGreenI实时荧光定量PCR反应液，从细胞样品中提取DNA，进行荧光定量PCR反应，同时引入标准阳性模板，引物序列分别为正义引物：5’-GCCGTCATTCCTAAAAAAAGTGGT-3’，反义引物：5’-ATCAAAGCCTTGTTGTCTCCGA-3’，扩增子大小为176bp，标准阳性DNA模板由已插入小鼠痘病毒保守的病毒核心DNA连接蛋白编码区176bp的pTA2载体转化大肠杆菌DH5α，增殖后提取质粒，并于紫外分光光度计测A260定量并10倍梯度稀释。结果更加准确、可靠，重复性好。灵敏度高、定量快速准确、检测范围广、稳定性好。也可以为相关基础研究提供技术支持，应用前景十分广泛。

主权项

一种检测小鼠痘病毒的荧光定量PCR试剂盒，该试剂盒含有：a)DNA提取液、b)引物、c)标准阳性模板、d) SYBR Green I实时荧光定量PCR反应液，其特征在于：从细胞样品中提取DNA，进行荧光定量PCR反应，同时引入标准阳性模板，引物序列分别为正义引物：5’‑GCCGTCATTCCTAAAAAAAGTGGT‑3’，反义引物：5’‑ATCAAAGCCTTGTTGTCTCCGA‑3’，扩增子大小为176bp，标准阳性DNA模板由已插入小鼠痘病毒保守的病毒核心DNA连接蛋白编码区176bp的pTA2载体转化大肠杆菌DH5α，增殖后提取质粒，并于紫外分光光度计测A260定量并10倍梯度稀释。