一种具有酶催化性能的纳米金-蛋白质复合材料的制备方法

摘要

本发明提供了一种具有酶催化性能的纳米金-蛋白质复合材料的制备方法，包括：先将纳米金溶胶用氮气吹扫脱气后分散于含有吐温20的磷酸缓冲溶液中，再与巯基十一酸混合，常温下静置反应；混合液离心、去清、重悬过程，直至上层清夜中不含巯基十一酸；离心收集MUA保护的纳米金并分散于磷酸缓冲溶液中备用；再将MUA保护的纳米金与EDAC、NHS、内切酶混合加入MES缓冲溶液中，常温静置反应；最后重复离心、去清、重悬过程，所得的复合材料分散于磷酸缓冲溶液中。本发明的制备方法不涉及对酶的复杂化学修饰，不影响其活性；反应在室温进行，条件温和；制备的功能化纳米金-蛋白质复合材料不容易受到溶液介质的影响，具有很好的稳定性。

主权项

一种具有酶催化性能的纳米金‑蛋白质复合材料的制备方法，包括：(1)巯基十一酸根保护的纳米金的制备；(2)将步骤(1)获得的巯基十一酸根保护的纳米金与内切酶连接制备所述具有酶催化性能的纳米金‑蛋白质复合材料；其中，步骤(1)具体包括如下步骤：(1‑1)将纳米金胶体用氮气吹扫脱气10‑60秒；(1‑2)将脱气后的纳米金胶体分散于含有吐温20的磷酸缓冲溶液中，稳定至少20分钟，然后加入巯基十一酸水溶液，常温下静置2‑4小时，获得混合液；其中，纳米金胶体与巯基十一酸的摩尔比为1∶(100‑200)；(1‑3)将步骤(1‑2)获得的混合液离心分离，去除上层清液后，将沉淀溶于磷酸缓冲溶液中，超声分散；(1‑4)重复步骤(1‑3)的离心、去清、重悬过程，直至上层清液中不含巯基十一酸，将离心收集到的巯基十一酸根保护的纳米金分散于磷酸缓冲溶液中备用；步骤(2)具体包括如下步骤：(2‑1)将步骤(1)中获得的巯基十一酸根保护的纳米金的磷酸缓冲溶液与1‑乙基‑3‑(3‑二甲基胺丙基)碳化二亚胺盐酸盐EDAC、N‑羟基琥珀酰亚胺NHS以及内切酶加入到2‑(N‑吗啉代)乙磺酸MES缓冲溶液中，常温静置反应2‑4小时，获得混合液；(2‑2)将步骤(2‑1)获得的混合液离心分离，去除上层清液后，将沉淀溶于磷酸缓冲溶液中，超声分散；(2‑3)重复步骤(2‑2)的离心、去清、重悬过程，直至上层清液中不含EDAC、NHS、MES以及内切酶；(2‑4)离心分离，收集具有酶催化性能的纳米金‑蛋白质复合材料，将获得的具有酶催化性能的纳米金‑蛋白质复合材料分散于磷酸缓冲溶液中即可。