鉴定PI3K相互作用分子和纯化PI3K的方法

摘要

本发明涉及鉴定PI3K相互作用化合物的方法，其包括以下步骤：a)提供包含PI3K的蛋白质制剂，b)在允许形成苯基噻唑配体1-PI3K复合物的条件下，使所述蛋白质制剂与固定在固体支持物上的苯基噻唑配体1接触，c)使苯基噻唑配体1-PI3K复合物与给定的化合物一起温育，和d)确定所述化合物是否能够从固定的苯基噻唑配体1中分离PI3K。此外，本发明涉及鉴定PI3K相互作用化合物的方法，其包括以下步骤：a)提供包含PI3K的蛋白质制剂，b)在允许形成苯基噻唑配体1-PI3K复合物的条件下，使所述蛋白质制剂与固定在固体支持物上的苯基噻唑配体1接触，和c)检测在步骤b)中形成的苯基噻唑配体1-PI3K复合物。此外，本发明涉及鉴定PI3K相互作用化合物的方法，其包括以下步骤：a)提供包含PI3K的蛋白质制剂的两份等分试样，b)在允许形成苯基噻唑配体1-PI3K复合物的条件下，使一份等分试样与固定在固体支持物上的苯基噻唑配体1接触，c)在允许形成苯基噻唑配体1-PI3K复合物的条件下，使另一份等分试样与固定在固体支持物上的苯基噻唑配体1以及给定的化合物接触，d)确定在步骤b)和c)中形成的苯基噻唑配体1-PI3K复合物的量。此外，本发明涉及鉴定PI3K相互作用化合物的方法，其包括以下步骤：a)提供各自包含至少一种含有PI3K的细胞的两份等分试样，b)使一份等分试样与给定的化合物一起温育，c)收获各等分试样的细胞，d)裂解所述细胞以获得蛋白质制剂，e)在允许形成苯基噻唑配体1-PI3K复合物的条件下，使所述蛋白质制剂与固定在固体支持物上的苯基噻唑配体1接触，和f)确定在步骤e)中在各等分试样中形成的苯基噻唑配体1-PI3K复合物的量。

主权项

用于鉴定PI3K相互作用化合物的方法，其包括以下步骤：a)提供包含PI3K的蛋白质制剂，b)在允许形成3‑(2‑{2‑[2‑(2‑氨基‑乙氧基)‑乙氧基]‑乙氧基}‑乙氧基)‑N‑[5‑(4‑氯‑3‑甲磺酰基‑苯基)‑4‑甲基‑噻唑‑2基]‑丙酰胺盐酸盐‑PI3K复合物的条件下，使所述蛋白质制剂与固定在固体支持物上的3‑(2‑{2‑[2‑(2‑氨基‑乙氧基)‑乙氧基]‑乙氧基}‑乙氧基)‑N‑[5‑(4‑氯‑3‑甲磺酰基‑苯基)‑4‑甲基‑噻唑‑2基]‑丙酰胺盐酸盐接触，c)使3‑(2‑{2‑[2‑(2‑氨基‑乙氧基)‑乙氧基]‑乙氧基}‑乙氧基)‑N‑[5‑(4‑氯‑3‑甲磺酰基‑苯基)‑4‑甲基‑噻唑‑2基]‑丙酰胺盐酸盐‑PI3K复合物与给定的化合物一起温育，和d)确定所述化合物是否能够从固定的3‑(2‑{2‑[2‑(2‑氨基‑乙氧基)‑乙氧基]‑乙氧基}‑乙氧基)‑N‑[5‑(4‑氯‑3‑甲磺酰基‑苯基)‑4‑甲基‑噻唑‑2基]‑丙酰胺盐酸盐中分离PI3K。