摘要 |
<p>Resení se týká reakcní smesi pro molekulární detekci viroidu vretenovitosti hlíz bramboru pomocí kvantitativní RT-PCR, která je charakterizována tím, ze obsahuje 1 .mi.l vzorku testované RNA, 12,5 .mi.l 2x master mixu obsahujícího smes pufru, DNA polymerázy, deoxyribonukleotidu, a chloridu horecnatého, 1,0 .mi.l smesi reverzní transkriptázy a inhibitoru RNáz, dále 9,3 .mi.l sterilní destilované vody doplnující reakcní smes do konecného objemu 25 .mi.l a 0,1 .mi.l kazdého primeru o koncentraci 100.mi.M a specifické nukleotidové sekvenci QRT R_PSTVd: CTT TCT TCg ggT gTC CTT CC QPCR R_PSTVd: CTC ggg AgC TTC AgT TgT TTC, které amplifikují fragment o velikosti 101 bp, a 1 .mi.l sondy PSTVd o koncentraci 30.mi.M a specifické nukleotidové sekvenci TgCgCTgTCgCTTCggCTACT, pricemz tato sonda je znacena fluorescencním barvivem 6-karboxyfluoresceinem (FAM) a jako zhásec je pouzit tetramethylkarboxyrhodamin (TAMRA)..sub. .n.</p> |