酶法制备磷脂酰胆碱型Ω-3不饱和脂肪酸的方法

摘要

本发明涉及一种酶法制备磷脂酰胆碱型Ω-3不饱和脂肪酸的方法，其特征在于：所述方法包括如下工艺步骤：步骤一：以海豹油甘油三酯为原料，经脂肪酶选择性酶解并分离纯化，得到高纯度海豹油游离型Ω-3不饱和脂肪酸；步骤二：将步骤一得到的高纯度海豹油游离型Ω-3不饱和脂肪酸作为原料，加入溶血磷脂酰胆碱，在酶非水相催化作用下，得到磷脂酰胆碱型Ω-3不饱和脂肪酸产品。本制备方法成本低、污染小、纯度高，富含DPA、EPA和DHA。

主权项

一种酶法制备磷脂酰胆碱型Ω‑3不饱和脂肪酸的方法，其特征在于：所述方法包括如下工艺步骤：步骤一：以海豹油甘油三酯为原料，经脂肪酶选择性酶解并分离纯化，得到高纯度海豹油游离型Ω‑3不饱和脂肪酸；步骤二：将步骤一得到的高纯度海豹油游离型Ω‑3不饱和脂肪酸作为原料，加入溶血磷脂酰胆碱，在酶非水相催化作用下，得到磷脂酰胆碱型Ω‑3不饱和脂肪酸产品； 步骤一的具体方法为：在反应容器中加入海豹油5‑6克和pH为7‑8的缓冲液5‑6mL，再加入800‑1000U/ mL脂肪酶，在20‑40℃条件下搅拌酶解8‑10小时，用0.2‑0.4mol/L氢氧化钠乙醇溶液开展相分离，除去甘油二酯，获得的游离脂肪酸相，取4‑6 g尿素和25‑35 mL乙醇加入一圆底烧瓶中，放入60‑65℃水浴中，搅拌直至溶液澄清，迅速倒入盛有游离脂肪酸相的烧杯中，边搅拌边冷却至室温，置于冰箱中‑35 ℃ 结晶，将结晶混合物迅速抽滤，得结晶包合物和滤液两部分，滤液经过除杂纯化，可获得高纯度海豹油游离型Ω‑3不饱和脂肪酸；步骤二中所述的酶为脂肪酶、磷脂酶A1或磷脂酶A2；步骤二的具体方法为：在反应容器中加入步骤一制得的高纯度海豹油游离型Ω‑3不饱和脂肪酸0.5‑0.7克，然后再加入溶血磷脂酰胆碱0.1‑0.2克、正己烷3‑5mL、1‑2克酶，反应温度在30‑50℃条件下，搅拌10‑20小时，然后过滤，再将滤液在60℃减压蒸馏，将3‑5mL丙酮加入到剩下的溶液中，过滤，将沉淀物在真空干燥箱中干燥得到反应产物。