发明名称 |
一种载蛋白的磁性微球的制备方法 |
摘要 |
一种载蛋白的磁性微球的制备方法:(1)将三价铁离子盐及乙酸钠加入到乙二醇溶液中反应;磁性分离;(2)将Fe3O4颗粒于盐酸中溶解,磁性分离后分散于乙醇、蒸馏水、浓氨水的混合溶液中;加入原硅酸四乙酯搅拌,磁性分离;(3)将Fe3O4@SiO2磁性微球于盐酸中溶解,磁性分离,加入到甲苯溶液中,搅拌分散,在氮气氛围下加入环氧化试剂和三乙胺,加热回流;冷却,磁性分离;(4)将环氧化的Fe3O4@SiO2磁性微球加入蛋白溶液,37℃摇床恒温偶联;加入封闭试剂对未反应的氨基于37℃中和,得到载蛋白的磁性微球。本发明原料简单易得,易于放大,产品性能优越,可调控性强,适用于分离纯化免疫球蛋白及免疫沉淀等领域。 |
申请公布号 |
CN103007846A |
申请公布日期 |
2013.04.03 |
申请号 |
CN201210540578.7 |
申请日期 |
2012.12.14 |
申请人 |
无锡百运纳米科技有限公司 |
发明人 |
徐卫;宋芳;曹松峰 |
分类号 |
B01J13/02(2006.01)I;C07K1/22(2006.01)I |
主分类号 |
B01J13/02(2006.01)I |
代理机构 |
无锡华源专利事务所 32228 |
代理人 |
冯智文 |
主权项 |
一种载蛋白的磁性微球的制备方法,其特征在于包括以下步骤:(1)制备Fe3O4颗粒:将可溶性的三价铁离子盐及乙酸钠加入到乙二醇溶液中并搅拌均匀;然后将该混合溶液放入密闭容器中,在180~300℃条件下反应4~72h;冷却后通过磁性分离,将所得产物洗涤后干燥,制得Fe3O4颗粒;(2)Fe3O4@SiO2核壳结构的制备:将步骤(1)制得的Fe3O4颗粒于盐酸溶液中溶解,然后磁性分离,将分离得到的颗粒洗涤;将洗涤后的颗粒分散于乙醇、蒸馏水、浓氨水的混合溶液中;向混合溶液中逐滴加入原硅酸四乙酯,室温搅拌6~24h后对产物进行磁性分离,并将其洗涤后干燥,得到Fe3O4@SiO2核壳结构,即Fe3O4@SiO2 磁性微球;(3)Fe3O4@SiO2 磁性微球的环氧化:将步骤(2)制得的Fe3O4@SiO2磁性微球于盐酸溶液中溶解,然后磁性分离,将分离得到的颗粒洗涤至中性并烘干;将烘干后的颗粒加入到经金属钠干燥脱水的甲苯溶液中,搅拌分散,然后在氮气氛围下加入环氧化试剂和经KOH干燥脱水的三乙胺,加热回流4~6h;冷却至室温,通过磁性分离,将所得产物用甲苯和丙酮洗涤后干燥,得到环氧化的Fe3O4@SiO2磁性微球;(4)载蛋白的磁性微球的制备:将步骤(3)制得的环氧化的Fe3O4@SiO2磁性微球用PBS溶液清洗,加入pH为7~9的蛋白溶液,于37℃摇床恒温偶联2~48h后再用PBS溶液清洗;然后加入封闭试剂对未反应的氨基于37℃中和2~12h后用PBS溶液清洗,得到载蛋白的磁性微球。 |
地址 |
213174 江苏省无锡市惠山区惠山经济开发区惠山大道1619号1131室 |