脱细胞纤维环基质的制备方法

摘要

本发明公开了一种脱细胞纤维环基质的制备方法，属于动物细胞或组织领域。本发明是取健康成年猪的脊柱纤维环，经无菌生理盐水充分漂洗；放入浓度为10mM，含0.05～0.5%EDTA、5～50KIU/ml抑肽酶的Tris缓冲液中4℃振荡；再放入含1～5%TritonX-100的上述Tris缓冲液，室温振荡；放入含0.05～0.5mg/ml脱氧核糖核酸酶、5～50ug/ml核糖核酸酶A的Tris缓冲液中，振荡；最后，无菌生理盐水振荡清洗，放在无菌PBS缓冲液中4℃保存。本发明的制备过程简单，细胞去除彻底，结构保留完整，基质含量及力学性能与天然纤维环相近，是一种良好的组织工程纤维环支架材料。

主权项

一种脱细胞纤维环基质的制备方法，其是按以下步骤进行的：（1）取健康成年猪的脊柱纤维环，无菌生理盐水充分漂洗； （2）在浓度为10mM，含0.05～0.5% EDTA、5～50 KIU/ml 抑肽酶的Tris缓冲液中4℃振荡48 h；（3）在浓度为10mM，含0.05～0.5% EDTA、5～50 KIU/ml 抑肽酶的Tris缓冲液中，加入1～5% 的TritonX‑100后，室温振荡12～96 h；（4）放入含0.05～0.5 mg/ml 脱氧核糖核酸酶、5～50 ug/ml核糖核酸酶A的Tris缓冲液，37℃振荡12～36 h；（5）无菌生理盐水振荡清洗24 h，放在无菌PBS缓冲液中4℃保存。