3种葵花籽多糖及葵花籽水溶性多糖的提取、分离纯化方法

摘要

本发明属于食品技术领域。以脱脂葵花籽粕为原料提取、分离纯化水溶性多糖。采用碱性亚硫酸氢钠溶液浸提、离心除渣、无机酸酸沉除蛋白、碱中和的方法提取葵花籽粗多糖；所得的葵花籽粗多糖采用超滤分离得浓缩液，浓缩液经酶法结合有机酸法除蛋白、离子交换脱色、醇沉及柱层析的方法制备葵花籽多糖。利用该法制备的葵花籽水溶性多糖包含三个组分，其中一个糖组分分子量约为37KD，其余糖组分分子量小于10KD。该水溶性多糖具有较高的抗氧化活性，在食品和医药工业具有广泛的应用前景。

主权项

一种以脱脂葵花籽粕为原料提取、分离纯化水溶性多糖的方法，其特征包括以下步骤：(a)采用浸提、离心除渣、酸沉除蛋白、碱中和的方法提取葵花籽粗多糖；(b)对步骤(a)处理所得的物料进行超滤浓缩、酶法结合三氯乙酸法除蛋白、脱色、醇沉、柱层析的方法分离纯化葵花籽多糖；所述步骤(a)中的浸提工艺条件为：温度40～70℃；碱性亚硫酸氢钠溶液体积与葵花籽粕的质量之比5～20∶1v/w，亚硫酸氢钠浓度以0.1％～2％w/v存在；pH值7.5～10.0；浸提时间0.5～6h；所述步骤(a)中离心除渣、酸沉除蛋白及碱中和工艺为：(1)0.1～2mol/l盐酸调节上清液pH至4.0～4.5后，3000～5000r/min离心10～30min；(2)0.1～2mol/l氢氧化钠调节上清液pH至7.0；所述步骤(b)中的超滤工艺为：超滤压力为0.01～0.1Mpa；温度为10～40℃；所述步骤(b)中的酶法结合三氯乙酸法除蛋白工艺为：(1)碱性蛋白酶法除蛋白：温度40～65℃，pH值7.5～9.0，酶添加量为1％～4.0％w/w，时间0.5～2h；(2)三氯乙酸处理酶解液进一步除蛋白：三氯乙酸浓度以0.1％～2％w/w，存在；时间以0.5～3h存在；所述步骤(b)中的脱色采用D296型树脂对多糖进行脱色，其特征在于：上样量为0.5～10ml；洗脱液为蒸馏水；洗脱流速为0.1～2ml/min；所述步骤(b)中的柱层析为采用DEAE Sepharose Fast Flow柱层析法分离葵花籽多糖，其工艺特征在于：上样量为0.5～10ml；洗脱流速为0.1～4ml/min；以蒸馏水、0.1～0.4mol/LNaCl溶液阶段梯度洗脱；蒸馏水洗脱分离得到DPW组分，0.1～0.4mol/LNaCl溶液洗脱分离得到DPN1组分；步骤(b)中所述的多糖纯化方法，采用Sepharose CL‑6B柱层析法分离葵花籽多糖组分——DPW及DPN1，其工艺特征在于：上样量为0.1～5ml；洗脱流速为0.1～2ml/min；洗脱液为0.1mol/LNaCl溶液；分离得到三个糖组分，其中DPW为单一组分，分子量小于10KD，DPN1含有两个组分，分别为DPN1‑S1和DPN1‑S2，DPN1‑S1分子量为37KD，DPN1‑S2分子量小于10KD。