一种重组人生长激素工程菌的发酵优化工艺

摘要

一种重组人生长激素工程菌的发酵优化工艺，其特征是，所述的发酵上罐按8％(v/v)接种量，通气量1vvm搅拌转速设为250r/min，发酵培养温度34度，初始pH值控制在7.2；当OD600达到6-7时，pH值控制为7.4，溶氧DO 20％，升温至42度加诱导剂诱导4小时，完成发酵周期。本发明工艺具有高稳定表达特点，同时提高了重组人生长激素工程菌的蛋白表达，提高了发酵设备和原料的利用率。可延长发酵周期。增大放罐体积、提高发酵罐的利用率、降低发酵液残糖浓度、将单罐总产量提高20％左右。

主权项

一种重组人生长激素工程菌的发酵优化工艺，所述的发酵优化工艺如下：1)菌种培养：配制菌种培养基，接入构建基因工程菌E.coliBL21‑HGH进行菌种培养，获得液体发酵菌种；2)配制发酵培养基：以LB培养基为基础，置入发酵罐中，加入糖及无机盐，加入水，调节PH值。得到发酵培养基；3)发酵：将上述所得发酵培养基灭菌之后，按8％(v/v)接种量接入步骤1)所得液体发酵菌种，通气量1vvm，搅拌转速设为250r/min，发酵培养温度34度，培养基pH值7.4；进入对数生长期后，控制溶氧浓度至少在20％，当pH值降至7.0时候，通过流加26％(v/v)氨水使得pH值维持在7.2‑7.4；当OD600达到6‑7时，升温至42度加入诱导剂诱导4小时；4)收集菌种：将发酵液接入管式离心机，得到菌种，破碎后分离纯化得到目标蛋白。