一种催化合成东莨菪碱的方法和重组菌株

摘要

本发明属于生物工程技术领域，公开了一种重组菌株及利用该菌株催化合成东莨菪碱的方法。重组菌株中含有外源的三分三莨菪碱6β-羟化酶基因，可将莨菪碱底物转化为东莨菪碱，转化效率达80％。本发明提供了一种生产高药用价值的东莨菪碱的方法，可满足重要临床需求的东莨菪碱提供了一种新型优质药源。

主权项

一种催化合成东莨菪碱的方法，其特征在于，以莨菪碱为底物，以异丙基‑β‑D‑硫代吡喃半乳糖苷为诱导表达剂，浓度为0.5～1mM，用重组菌株催化合成东莨菪碱，步骤包括：将莨菪碱与接种有重组菌株的培养基混合，20～30℃下培养12～72小时；莨菪碱的浓度为0.2‑1g/L，重组菌株的OD600=0.5～0.8；所述的重组菌株，含有重组载体，所述重组载体为pET系列、pQE系列、pGEX系列或pMAL系列的质粒，携带的外源基因为三分三莨菪碱6β‑羟化酶基因；宿主为编码lon蛋白酶和ompt外膜蛋白酶的基因缺损的大肠杆菌B型菌株。