一种钩端螺旋体属特异性抗体胶体金快速检测试纸条

摘要

本发明提供了一种用于检测钩端螺旋体抗体的快速检测试纸条包括反应膜和结合物释放垫，所述反应膜具有同时包被钩端螺旋体属特异性抗原ompL1和LipL32的检测带和包被兔抗钩端螺旋体属特异性抗原的多克隆抗体的质控带；所述结合物释放垫包被有胶体金标记的钩端螺旋体属特异性抗原ompL1和LipL32，应用膜层析双抗原夹心法，检测标本中钩端螺旋体属特异性抗体。应用本发明试纸条检测，操作简单、方便、快速、简捷，不需特殊仪器设备，不需专业培训，结果清晰易辨，操作简单，易于推广，适合基层，适合于现场检测和流行病学调查，对钩端螺旋体感染诊断起到辅助作用。

主权项

一种检测试纸条，包括反应膜和结合物释放垫，所述反应膜具有同时包被钩端螺旋体属特异性抗原ompL1和LipL32的检测带和包被兔抗钩端螺旋体属特异性抗原的多克隆抗体的质控带；所述结合物释放垫包被有胶体金标记的钩端螺旋体属特异性抗原ompL1和LipL32；所述反应膜为硝酸纤维素膜，结合物释放垫为玻璃纤维膜；所述胶体金标记的钩端螺旋体属特异性抗原ompL1和LipL32是通过以下方法制备的：将混合的表达蛋白ompL1和LipL32按1:1混合，胶体金标记的pH值为8.4，胶体金和抗原的配比为50μg/ml胶体金；标记的胶体金‑抗原结合物经稳定剂处理后，按每平方厘米65μl的量，均匀吸附于玻璃纤维上，冷冻干燥，并在干燥环境中保存，所述稳定剂配方为0.5%BSA，pH8.0，0.01M Tris缓冲液；硝酸纤维素膜上包被抗原的方法为：将表达蛋白ompL1和LipL32按1:1混合，用0.01M PBS稀释成3mg/ml，将抗ompL1和LipL32的多克隆抗体用0.01M PBS稀释成2mg/ml，用喷膜机将二者以1μl/cm的量喷于硝酸纤维膜上，分别形成检测线和对照线，两条线之间的间隔为0.5cm，把固定有抗原抗体的硝酸纤维置37℃烤箱中干燥2小时，干燥环境中保存备用。