一种发酵生产漆酶的方法

摘要

本发明提供了一种发酵生产漆酶的方法，该方法包括真菌分泌漆酶培养基的配制和产酶发酵，所述真菌分泌漆酶培养基为：每100mL的液体培养基中含有葡萄糖1-4g，酒石酸铵1-2.5g，ABTS0.05-0.25mmol/L，VB10.6mg/L，大量元素，微量元素，余量为水，用NaOH或HCl调节初始pH=5.0-6.0。随着研究的不断深入，漆酶的应用已经渗透到工业、农业和医疗等领域，然而在漆酶的大规模工业化生产方面，以及探索适宜的发酵条件等方面报道较少，仍然是今后研究的热点。本发明建立了发酵生产漆酶的工艺条件，为实现漆酶的工业化生产打下基础。该方法可提高漆酶的产量和质量。

主权项

一种发酵生产漆酶的方法，包括真菌分泌漆酶培养基的配制和产酶发酵，其特征在于：所述真菌为一色齿毛菌(Cerrena unicolor)；所述真菌分泌漆酶培养基为：每100mL的液体培养基中含有葡萄糖2g，酒石酸铵1.5g，ABTS 0.05mmol/L，VB10.6mg/L，大量元素，微量元素，余量为水，用NaOH或HCl调节初始pH=5.0；其中大量元素为：KH2PO4 20.0g/L，MgSO4。7H2O 13.8g/L，CaCl2 1.0g/L和NaCl 0.6g/L；微量元素为：MnSO4。H2O 0.35g/L，FeSO4。7H2O 60mg/L，CoCl2。6H2O 110mg/L，ZnSO4。7H2O 60mg/L，CuSO4。5H2O 95 mg/L，AlK(SO4)2。12H2O 6mg/L，H3BO3 6mg/L和NaMoO4。2H2O 6mg/L；发酵工艺条件为：接种量8%，发酵温度25℃，转速200r/min，装液量60mL/250mL；接种的种子液的制备方法为：将在PDA平板上活化好的菌种用打孔器制成10‑12mm菌块，将得到的菌块接入PDA液体培养基中，所述PDA液体培养基的配制为马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15‑20g，蒸馏水1000mL；PDA液体培养基装液量为100mL/250mL三角瓶，每瓶接种3个菌块，然后在转速200r/min，温度30℃摇床中恒温振荡培养4d，制成种子液。