一种猪嵴病毒RT-PCR检测试剂盒

摘要

本发明公开了一种猪嵴病毒RT-PCR检测试剂盒，按照每个试剂盒检测20个样品计，每次检测样品时设阳性、阴性对照，试剂盒组成：阳性对照模板；阴性对照样品；上游引物P1和下游引物P2浓度均为10pmol/ul，各30ul，每个样品各用0.5ul；2×Taq PCR Master Mix：300ul，每个样品用5ul；ddH2O：200ul，每个样品用3ul；矿物油：600ul，每个样品加10ul。本发明与现有技术相比有以下优点：灵敏度高，最低可以检测1pg病毒核酸；检测时间短。

主权项

一种猪嵴病毒RT‑PCR检测试剂盒，其特征在于，按照每个试剂盒检测20个样品计，每次检测样品时设阳性、阴性对照，试剂盒组成：阳性对照模板：猪嵴病毒阳性样品抽提RNA，逆转录后获得的cDNA，共20ul，每次1ul；阴性对照样品：SPF猪粪便样品和PBS按SPF猪粪便样品的重量：PBS的体积＝0.5～1.0∶1加入PBS混匀，3000r/min离心15min，取上清液抽提RNA，逆转录后获得的cDNA，共20ul，每次用1ul；上游引物P1和下游引物P2浓度均为10pmol/ul，各30ul，每个样品各用0.5ul；上游引物P1：5’‑CGTCTCATTGGAGATGAACG‑3’；下游引物P2：5’‑TTTGTCGTAGAACTCCTTGA‑3，；2×Taq PCR Master Mix：300ul，每个样品用5ul；ddH2O：200ul，每个样品用3ul；矿物油：600ul，每个样品加10ul。