用于纯化蛋白质的方法

摘要

提供了两阶段的热处理方法，以改进包含具有过水解活性的酶的重组微生物生物质的可加工性。更具体地，提供了处理包含具有过水解活性的栖热袍菌属乙酰木聚糖酯酶的重组微生物生物质的方法，使得微量过滤可以被用于部分纯化和/或浓缩蛋白质制备物。所述乙酰木聚糖酯酶可以被用于生产适用于多种应用如清洁、杀菌、消毒、漂白、木浆处理、和纸浆处理应用中的过氧羧酸。

主权项

方法，其包括：(a)提供包含可溶性和不溶性组分的微生物细胞匀浆，其中所述微生物细胞匀浆包含重组生产的具有过水解活性的嗜热酶；(b)使所述微生物细胞匀浆在40℃至65℃的温度范围内经历至少4小时但不超过24小时范围的第一热处理期；(c)使来自步骤(b)的经热处理的微生物细胞匀浆在75℃至85℃的温度范围内经历5分钟至4小时范围的第二热处理期；(d)通过离心或过滤从进行步骤(b)和步骤(c)之后获得的微生物细胞匀浆移除所述不溶性组分，以获得包含重组生产的具有过水解活性的嗜热酶的溶液；以及(e)通过过滤、蒸发或蛋白质沉淀和再溶解的组合，浓缩步骤(d)的包含嗜热酶的溶液，从而获得包含具有过水解活性的重组嗜热酶的浓缩物。