一种用扩张床吸附技术从乳清中提纯乳铁蛋白的方法

摘要

本发明提供了一种用扩张床吸附技术从乳清中提纯乳铁蛋白的方法。包括以下步骤：1）甜乳清粉加水溶解制成乳清溶液或采用市售液态乳清液,用NaOH调节pH；2）扩张床内装填阳离子交换层析介质，用磷酸盐缓冲液从下向上通过床层，平衡扩张床；3）通入步骤1）的溶液进行吸附，再用含NaCl的缓冲液进行洗脱，收集洗脱液；4）最后用NaOH清洗，并用缓冲液再生介质。本发明以扩张床吸附为核心分离方法，一步分离得到乳铁蛋白的纯度能达到88～93%之间，回收率在47%～86%之间，工艺简便高效，设备投资低，适合工业化生产。

主权项

一种用扩张床吸附技术从乳清中提纯乳铁蛋白的方法，其特征在于包括以下步骤：1）甜乳清粉加水溶解制成质量百分比浓度为20～80 g/L的乳清溶液或采用市售液态乳清液,用NaOH调节pH至7.0 ～8.0；2）扩张床内装填阳离子交换层析介质，阳离子交换介质为Streamline SP，Streamline SP XL或Fastline SP；用pH7.0 ～8.0的磷酸盐缓冲液从下向上通过床层，平衡扩张床，床层稳定膨胀时，膨胀率介于1.8～2.6；3）通入步骤1）的溶液进行吸附，然后通入步骤2）所用的缓冲液冲洗直至没有蛋白洗出，再用含0.1～1 M NaCl的pH7.0～10.0的磷酸盐缓冲液或者碳酸盐缓冲液洗脱，收集洗脱液，其纯度为88～93%，乳铁蛋白回收率为47%～86%；4）最后用0.2～0.5 M NaOH在位清洗，并用pH7.0的磷酸盐缓冲液使介质再生。