发明名称 提取乙肝病毒核酸的方法
摘要 本发明公开了一种提取乙肝病毒核酸的方法,所述方法通过将活化的磁珠与乙肝病毒的特异性抗体偶联,使得偶联后的磁珠在存在乙型肝炎病毒颗粒的血清中可以特异性地吸附病毒颗粒,用简单的缓冲液即可将多余的杂质去除,之后加入病毒裂解液将病毒细胞裂解,从而得到病毒核酸。由于磁珠的引入,可以使自动化变得简单,抗原抗体的高特异性反应使得提取时间变得更短,特异性强;所用的试剂比较简单易得。
申请公布号 CN102816754A 申请公布日期 2012.12.12
申请号 CN201210245731.3 申请日期 2012.07.16
申请人 北京利德曼生化股份有限公司 发明人 不公告发明人
分类号 C12N15/10(2006.01)I;C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I 主分类号 C12N15/10(2006.01)I
代理机构 北京风雅颂专利代理有限公司 11403 代理人 李弘;杨红梅
主权项 一种提取乙肝病毒核酸的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:(1)活化磁珠:采用活化剂活化磁珠,并用缓冲液洗涤活化后的磁珠;(2)抗体偶联:将活化的磁珠与乙肝病毒的特异性抗体偶联,并用缓冲液洗涤偶联后的磁珠;加入淬灭液,与偶联后的磁珠混匀,并用缓冲液洗涤;在最后一次洗涤后,将磁珠重悬于缓冲液中,置于2~8℃下保存;(3)特异性结合:将偶联后的磁珠与血清混合并震荡混匀,使得所述磁珠与血清中的乙肝病毒颗粒进行特异性结合;作用一段时间后,用磷酸盐缓冲液对所述磁珠进行洗涤,富集和除杂质;加入裂解液裂解病毒细胞,使得乙肝病毒核酸释放到溶液中;将所述溶液煮沸,取上清液。
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