一种鼠李糖脂的制备方法及其应用

摘要

本发明公开了一种鼠李糖脂的制备方法及其应用，本发明以废弃油脂为碳源，利用铜绿假单胞菌发酵生产鼠李糖脂，结合乙醇的消泡作用，产量可达35-50g/L，使成本比传统方法低25-40％左右。含20-500mg/L鼠李糖脂溶液处理植物病害菌，对病害真菌菌丝体生长和孢子萌发的抑制率达40-90％，有效抑制植物真菌病害。含20-500mg/L鼠李糖脂溶液对蟑螂和蚜虫的杀虫效果明显。此外，将鼠李糖脂代替化学表面活性剂用作农药、肥料和饲料的助剂及含油污泥脱水剂，效果显著。

主权项

一种鼠李糖脂的制备方法，其特征在于，采用废弃油脂为碳源和发酵过程中采用乙醇进行消泡，步骤如下：(1)菌种培养：将微生物保藏编号为CCTCC NO：M209237的铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa ZJU‑211菌种接种到摇瓶种子培养基培养，温度为32‑38℃，摇床转速120‑200rpm，培养24‑48h得到摇瓶菌种；(2)发酵：将摇瓶菌种接种到发酵罐中，利用发酵培养基培养，接种体积分率为3‑10％，发酵过程温度控制在32‑38℃，通气量为0.2‑1.5vvm，搅拌转速200‑500rpm，发酵周期3‑5天；在发酵的中、后期，溢出泡沫回收器的泡沫采用乙醇消泡后返回发酵罐；发酵结束后得含菌体的发酵液；(3)超滤除菌体：发酵液通过中空纤维膜过滤去除菌体，得到去菌体发酵液，其含有鼠李糖脂35‑50g/L；(4)浓缩分离：在去菌体发酵液中加入酸，调节溶液pH至3.0～4.0，静置1～12h，倾去上清液，收集底部酸沉降物，得到含糖脂70～90％的浓缩鼠李糖脂产品；所述步骤(1)中，所述摇瓶种子培养基组成如下：废弃油脂，30～40g/L；NaNO3，2～4g/L；NaCl，0.5～1.5g/L；KCl，0.5～1.5g/L；CaCl2·2H2O，0.05～0.2g/L；KH2PO4，2～4g/L；Na2HPO4·12H2O，2～4g/L；MgSO4，0.1～0.3g/L；微量元素，1.5～2.5mL/L，余量为水；所述微量元素组成如下：FeCl3·6H2O0.01～0.08g/L，ZnSO4·7H2O 0.1～0.75g/L，CuSO4·5H2O 0.01～0.075g/L，MnSO4·H2O 0.1～0.75g/L，H3BO3，0.01～0.15g/L，余量为水；所述步骤(2)中，所述发酵培养基组成如下：废弃油脂，30～100g/L：NaNO3，4～8g/L；NaCl，0.5～1.5g/L；KCl，0.5～1.5g/L；CaCl2·2H2O，0.05～0.2g/L；KH2PO4，2～4g/L；Na2HPO4·12H2O，2～4g/L；MgSO4，0.1～0.3g/L；微量元素，1.5～2.5mL/L，余量为水；所述微量元素组成如下：FeCl3·6H2O0.01～0.08g/L，ZnSO4·7H2O 0.1～0.75g/L，CuSO4·5H2O 0.01～0.075g/L，MnSO4·H2O 0.1～0.75g/L，H3BO30.01～0.15g/L，余量为水。