发明名称 一种扩增未知序列的半随机PCR技术及其引物和试剂盒
摘要 本发明公开了一种扩增未知序列的半随机PCR技术及其引物和试剂盒。半随机引物序列从5’端到3’端依次为:12~30个固定碱基,3~8个全简并的碱基N和3~7个固定碱基,其中所述N为:A或G或C或T。半随机引物的序列如序列表中SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。包含该引物的PCR反应程序优选地包括:(1)95℃变性5分钟;(2)94℃变性30秒;(3)56℃退火30秒;(4)72℃延伸2分钟,步骤(2)~(3)重复30个循环;(5)72℃,延伸300秒;(6)产物于4℃保存。该半随机引物通用性强,特别适合未知基因序列的扩增,该PCR反应程序简单,扩增核酸目的序列特异性较强。
申请公布号 CN102757960A 申请公布日期 2012.10.31
申请号 CN201210266240.7 申请日期 2012.07.30
申请人 光明乳业股份有限公司 发明人 张红发;任婧
分类号 C12N15/11(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I 主分类号 C12N15/11(2006.01)I
代理机构 上海智信专利代理有限公司 31002 代理人 朱水平;沈利
主权项 一种寡核苷酸,其特征在于,所述寡核苷酸序列从5’端到3’端依次为:12~30个固定碱基,3~8个全简并的碱基N和3~7个固定碱基,其中所述N为:A或G或C或T。
地址 201103 上海市闵行区吴中路578号