发明名称 |
一种扩增未知序列的半随机PCR技术及其引物和试剂盒 |
摘要 |
本发明公开了一种扩增未知序列的半随机PCR技术及其引物和试剂盒。半随机引物序列从5’端到3’端依次为:12~30个固定碱基,3~8个全简并的碱基N和3~7个固定碱基,其中所述N为:A或G或C或T。半随机引物的序列如序列表中SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。包含该引物的PCR反应程序优选地包括:(1)95℃变性5分钟;(2)94℃变性30秒;(3)56℃退火30秒;(4)72℃延伸2分钟,步骤(2)~(3)重复30个循环;(5)72℃,延伸300秒;(6)产物于4℃保存。该半随机引物通用性强,特别适合未知基因序列的扩增,该PCR反应程序简单,扩增核酸目的序列特异性较强。 |
申请公布号 |
CN102757960A |
申请公布日期 |
2012.10.31 |
申请号 |
CN201210266240.7 |
申请日期 |
2012.07.30 |
申请人 |
光明乳业股份有限公司 |
发明人 |
张红发;任婧 |
分类号 |
C12N15/11(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/11(2006.01)I |
代理机构 |
上海智信专利代理有限公司 31002 |
代理人 |
朱水平;沈利 |
主权项 |
一种寡核苷酸,其特征在于,所述寡核苷酸序列从5’端到3’端依次为:12~30个固定碱基,3~8个全简并的碱基N和3~7个固定碱基,其中所述N为:A或G或C或T。 |
地址 |
201103 上海市闵行区吴中路578号 |