异核苷化合物或其亚磷酰胺衍生物及其制备方法和应用

摘要

本发明提供了一类异核苷化合物或其亚磷酰胺衍生物，该类化合物能够有效地提高经过其修饰的寡核苷酸的基因沉默效率，并且还能够保持该寡核苷酸的酶稳定性。本发明还提供了该类异核苷化合物或其亚磷酰胺衍生物的制备方法，还提供了寡核苷酸5’端磷酸化的固相合成方法，以及该类化合物在修饰寡核苷酸中的应用。

主权项

1.一种异核苷化合物的制备方法，该异核苷化合物具有如式I所示的结构：其中，n=3；B为胸腺嘧啶基(T)、尿嘧啶基(U)、胞嘧啶基(C)、鸟嘌呤基(G)或腺嘌呤基(A)，其特征在于，式I中的L-构型对映异构体采用如下的合成方法：A.将式IV中所示中间体与苯甲酰氯反应，使苯甲酰氯对3’羟基进行保护；Ｂ.将苯甲酰基保护后的式IV所示的化合物经酸水解后，得到式XIII中所示化合物；再将组分P，在四氢呋喃中与氢化钠反应一段时间后，加入式XIII中所示化合物，反应得式XIV中所示化合物，组分P为磷酰基乙酸三乙酯；Ｃ.将式XIV中所示化合物经催化氢化还原后，用氢化铝锂还原，得到式XV中所示化合物，再在N，N-二甲基甲酰胺中与咪唑，叔丁基二甲基氯硅烷反应或在吡啶中与4-二甲氨基吡啶，叔丁基二甲基氯硅烷反应，得到式XVI中所示化合物；XV   XVIＤ.将式XVI中所示化合物，通过微波辅助加热法与1,8-二氮杂双环(5.4.0)十一-7-烯(DBU)和不同碱基反应生成式XVII中所示化合物，其中的碱基包括胸腺嘧啶基、尿嘧啶基、胞嘧啶基、腺嘌呤基或鸟嘌呤基，再在四氢呋喃中与四丁基氟化铵反应，脱去叔丁基二甲基硅醚基，得到式XVIII中所示化合物；式I中的D-构型对映异构体以式IV的L-构型对映异构体为原料采用上述相同的合成方法合成得到。