一种从牛奶中直接获取活性蛋白的方法

摘要

本发明提供了一种从牛奶中直接获取活性蛋白的方法。本方法采用扩张床吸附技术，以超大孔薄层琼脂糖凝胶-玻璃珠复合介质为吸附介质，采用自下而上的进料方式，牛奶直接通过床层，牛奶中部分活性蛋白被介质吸附，吸附完成后，用一定浓度的氯化钠溶液洗脱，即可获得活性蛋白，该蛋白可直接冷冻干燥。该技术是一种高效集成的分离技术，经一步操作即可得到活性蛋白。整个过程不向牛奶中添加任何物质，操作时间短，产品活性损失小，是一种简捷、高效的获取牛奶中活性蛋白的方法。

主权项

一种从牛奶中直接获取活性蛋白的方法，包括如下步骤：(1)床层平衡：用超纯水以191cm/h的流速自下而上平衡扩张床吸附介质使床层的膨胀率为2左右，保持约20～30min，直至扩张床层稳定；其中扩张床吸附介质为粒径分布在50～300μm之间的超大孔薄层琼脂糖凝胶‑玻璃珠复合介质；(2)进料吸附：将鲜牛奶直接进样，为维持膨胀比不变，调节进料流速为229cm/h，当与扩张床出口处相连接的核酸蛋白检测仪示数维持不变时，证明床层中的介质已经吸附饱和，此时停止进料，进料过程中注意保证床层的稳定性；(3)冲洗：进料完毕后，保持床层扩张，以229cm/h的流速通入8～10倍柱体积的超纯水，清洗去滞留在床层中未被吸附的杂蛋白，直到核酸蛋白检测仪的示数不再变化为止；(4)洗脱：在2～20℃情况下，将床层改为固定床操作，以115cm/h的流速依次通入0.1mol/L、0.2mol/L的NaCl溶液，洗去被吸附的牛奶中的活性蛋白，在核酸蛋白检测仪出口处收集样品；(5)高盐洗脱：以115cm/h的流速用1.0mol/L的NaCl溶液，洗去与介质结合较牢固的杂质；(6)介质再生：用5～10倍扩张床体积的0.01～0.5mol/L碱溶液冲洗介质。