一株粘质沙雷氏菌强化蕈菌富集土壤重金属的方法

摘要

本发明属于环境微生物修复技术领域中的一种抗性微生物强化蕈菌修复重金属污染土壤的技术，是在污染土壤上种植蕈菌，在其覆土后施用粘质沙雷氏菌强化蕈菌对土壤重金属的吸附速度和能力。采收成熟的重金属蕈菌，将其投入沼气池进行减量处理，减量后沼液采用化学沉淀析出重金属，沼液经检测后达标排放，重金属沉淀和沼渣采用可控制的集中填埋。本发明以蕈菌为生物富集器，充分利用蕈菌富集重金属离子能力强、生长周期短的特点，结合粘质沙雷氏菌所具有活化重金属的能力，以达到更高效的联合修复结果。重金属污染土样中种植蕈菌并联合喷洒粘质沙雷氏菌对土壤修复功效要大于单纯种植蕈菌修复效果，重金属去除率可达90%。

主权项

一株粘质沙雷氏菌强化蕈菌富集土壤重金属的方法，其特征在于：（一）筛选特异性重金属抗性菌粘质沙雷氏菌针对受损土壤的污染物为重金属，其抗性菌的筛选过程包括采样、驯化、平板分离与纯化；（1）采样取受重金属污染严重地区的土样，存放于4℃冰箱中；（2）驯化取10 g土样加入100 mL灭菌水中，于30 ℃、150 r/min摇床振荡培养；1h后，分别取50 mL培养液分装到含有重金属的100 mL SLP培养基中，于30 ℃、150 r/min摇床振荡培养；一周后，再分别取50 mL培养液分装到含重金属的100 mL SLP培养基中，再于30 ℃和150 r／min摇床振荡培养一周；（3）平板分离与纯化各取10μL驯化好的菌液加入含有190μL SLP培养基的离心管中，摇匀；从中各取100μL分别涂布到含相同浓度重金属的SLP平板上，放入30 ℃恒温恒湿培养箱，培养2 d；观察微生物的生长情况，并从中挑取形态不同的菌落进行平板划线纯化，分离纯菌株；在筛选的起始阶段培养基中添加的重金属较低，为50 mg/L，驯化阶段逐渐增加重金属浓度；在平板分离过程中，选取长势较快并且回试仍有较强重金属抗性的菌株；以上其中：SLP培养基：蔗糖 1%; (NH4)2SO4 0.1%; K2HPO4 0.05%; MgSO4 0.05%; NaCl 0.01%; 酵母膏 0.05%; pH 7.2（二）蕈菌—特异性重金属抗性菌联合修复污染土壤在重金属污染土壤上栽种蕈菌，覆土后喷洒适量的抗性微生物菌剂，即可达到修复污染土壤。