一种广豆根组织培养快速繁殖方法

摘要

一种广豆根的组织培养快速繁殖方法，包括如下步骤：(1)取广豆根种子作为外植体进行消毒；(2)将消毒后的外植体置于MS基本培养基中诱导发芽得到无菌试管苗；(3)将所述无菌试管苗置于MS繁殖培养基中进行试管苗快速繁殖培养获得丛生芽；(4)将所述丛生芽置于MS壮苗培养基中进行壮苗培养得到健壮植株；(5)将所述健壮植株置于MS生根培养基中培养得到完整的带根苗；(6)取完整的带根苗进行炼苗后移植于沙床生长一个月，再移栽至大田。采用本发明所述方法得到的种苗健壮、成活率高，可在短期内提供大量广豆根的优质种苗，有效解决了广豆根的规模化育苗问题。

主权项

一种广豆根组织培养快速繁殖方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：(1)外植体的选择与消毒：取广豆根种子作为外植体，依次用2％洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15‑30min、添加2‑3滴吐温‑20的100毫升0.1％升汞消毒8‑10min、无菌水冲洗3‑5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，(2)种子萌发获得无菌试管苗：将步骤(1)得到的外植体接种到MS培养基中，在培养温度为23‑27℃，光照强度1500lux，光照时间为12‑14小时/天的条件下培养30天，种子发芽后获得无菌试管苗，其中MS培养基中含0.5mg/L的6‑BA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23‑27℃，光照强度1500lux，光照时间为12‑14小时/天的条件下培养30天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中含1.5mg/L的6‑BA、0.3mg/L的IAA、0.5mg/L的KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，(4)丛生芽壮苗培养：将步骤(3)中得到的试管苗丛生芽置于MS壮苗培养基中，在培养温度23‑27℃，光照强度1500lux，光照时间为12‑14小时/天的条件下培养30天得到健壮植株，其中MS壮苗培养基中含1.0mg/L的6‑BA、0.5mg/L的IAA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，(5)健壮植株生根培养：将步骤(4)中得到的健壮植株置于MS生根培养基中，在培养温度23‑27℃，光照强度1500lux，光照时间为12‑14小时/天的条件下培养30天得到带根的完整植株，其中MS生根培养基中含1.5mg/L的IAA、0.5mg/L的ABT生根粉、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，(6)炼苗与移栽：步骤(5)获得带根的完整植株后，在室温为25℃的室内打开瓶盖，在瓶中加入少量自来水，炼苗2‑4天，表面角质形成后将苗取出，洗净根部培养基，立即移栽到沙床中，在沙床中生长一个月后移栽大田。