一种含人脐带间充质干细胞分泌液的培养基及其制备方法和应用

摘要

本发明涉及一种含人脐带间充质干细胞分泌液的培养基及其制备方法和应用，建立了脐带间充质干细胞有限细胞系，鉴定其生物学特性；建立人脐带间充质干细胞分泌液制备方法；证明人脐带间充质干细胞(HUCMSC)分泌液在体外能够促进细胞再生、改善细胞功能、抑制细胞凋亡。ELISA检测证明人脐带间充质干细胞分泌液含有丰富的促进细胞增殖、抑制细胞凋亡的细胞因子，如HGF、VEGF、bFGF等。

主权项

一种含人脐带间充质干细胞分泌液的培养基的制备方法，其特征在于：步骤如下：(1)收集脐带细胞后进行原代培养，待细胞长满瓶底，进行传代培养，每周传代1次，取第5‑9代细胞经流式细胞仪检测表达CD29、CD49、CD90、CD105、HLA‑1，基本不表达造血细胞标志CD34、CD45，内皮细胞标志CD31；(2)制备含UCMSC分泌物的MSC条件培养基：将UCMSC培养至第五代；待细胞70％至80％融合时，充分洗涤培养瓶，倒入15mL含有0.05％牛血清白蛋白的DMEM；24小时后收集此培养基，用3kDa的离心超滤管，3800rpm，离心30分钟，即获得含人脐带间充质干细胞分泌液的培养基。