表面活性剂产生菌-菌根联用修复土壤多环芳烃的方法

摘要

本发明表面活性剂产生菌-菌根联用修复土壤多环芳烃的方法,属于环境修复、污染物处理领域。针对目前植物修复或者菌根修复所面临的实际瓶颈，通过将生物表面活性剂surfactin的高产菌株枯草芽孢杆菌B.subtilisBS1和AMF相结合，充分发挥了两者的功能和特性：B.subtilisBS1作为生物表面活性剂的供体，能够增强有机污染物向根际的迁移；AMF增强植物对有机污染物的亲和与吸收效果，提高植物对有机污染物毒性胁迫的耐受性，同时增强根际微生物的代谢活性。该专利建立了新型的高效集成修复技术，提高土壤中PAHs的修复效率，缩短修复时间，具有很强的实际应用价值。

主权项

表面活性剂产生菌‑菌根联用修复土壤多环芳烃的方法，其特征在于按照下述步骤进行：（1）枯草芽孢杆菌B. subtilis BS1的扩增培养：将枯草芽孢杆菌B. subtilis BS1用酵母膏蛋白胨液体培养基，于30 oC，转速180 rpm条件下进行培养，当菌体生长到对数生长期后期时收集菌体，制备种子液；（2）枯草芽孢杆菌B. subtilis BS1菌剂制备：将步骤（1）所得的种子液在发酵罐中扩大培养，发酵温度30 oC，初始pH值7.2，26~28 h，即得液体菌剂；按照质量比草炭土45%，活性炭30%，锯末10%，稻壳15%配置载体，并经风干研磨，过60目筛，混合均匀制成固体载体，灭菌风干，按照液体菌剂与固体载体按质量比例1：1混合均匀即得BS1固体菌剂；（3）AMF菌剂的制备：将菌根真菌Glomus etunicatum用10 mM柠檬酸钠以1: 10的体积比混合溶解其中的植物凝胶，然后将提取其中的真菌孢子；将河砂过60目筛，与田园土按2：1的比例混合均匀，灭菌，盛于花盆中；在砂土混合基质上接种获得的孢子，同时种植玉米，适当浇灌霍格兰营养液，60天后将收获AMF菌剂；（4）PAHs污染土壤的表面活性剂产生菌‑菌根联用修复：在被PAHs污染的土壤中，先将步骤（3）中的AMF菌剂混入土壤中，然后种植一棵玉米；待玉米幼苗高度约30 cm时，将步骤（2）中的BS1固体菌剂接种在玉米的根际，使得根际的菌浓达到l×105CFU/ 每克土壤；待玉米完成生长周期后，即可达到修复土壤多环芳烃的目的。