利用大肠埃希氏菌BA305发酵生产丁二酸的方法

摘要

本发明属于生物工程技术领域，涉及利用大肠埃希氏菌BA305发酵生产丁二酸的方法。通过提高大肠埃希氏菌BA305对ATP的供给，在两阶段发酵过程中提高丁二酸生产效率，并在循环利用细胞产丁二酸的过程中，保持生产性能，延长丁二酸生产能力。

主权项

一种利用大肠埃希氏菌（Escherichia coli）BA305发酵生产丁二酸的方法，其特征在于循环利用重组大肠杆菌细胞生产丁二酸：（1）利用重组大肠杆菌采用两阶段发酵生产丁二酸用LB培养基活化菌体，将大肠埃希氏菌 BA305接种入发酵罐，发酵培养基为LB培养基并添加碳源，通入空气或纯氧进行有氧培养，当有氧培养菌体OD600至0.4～0.6用0.3 mM的IPTG诱导，继续有氧培养15h至OD600=19，停止通入空气或纯氧，通入CO2并添加碳源进行厌氧发酵产酸，同时添加中和剂调控pH值6.4‑6.8；（2）当步骤（1）的培养基中测定无残糖时，两阶段发酵结束；通过无菌离心或无菌膜过滤获得菌体细胞，并将菌体细胞继续加入新鲜LB培养基及碳源，重复厌氧发酵丁二酸的步骤。