发明名称 |
一种鉴别番茄耐盐性状的分子标记方法 |
摘要 |
本发明提供的一种鉴别番茄耐盐性状的分子标记方法,包括以下步骤:1)番茄耐盐主效基因定位;2)人工设计合成一对核苷酸序列作为引物,该引物是由碱基组成的特定序列的寡聚体,其中正向引物:5’GCCAATCCAAACAAACCA’3,反向引物:5’CATTGTCTCCTTCGCCTCG’3;3)提取番茄基因组的DNA,利用引物对番茄基因组DNA进行PCR扩增,无需特异性内切酶酶切,就可得到有差异的产物条带,利用此标记PCR产物片断的大小可鉴别出番茄耐盐材料和盐敏感材料;4)PCR产物在1.5%琼脂糖凝胶上电泳、溴化乙锭染色,用凝胶成像系统观察拍照得耐盐材料PCR产物有1000bp的1条谱带,盐敏感材料有900bp的1条谱带。方法步骤为:定位耐盐基因,选用含有耐盐基因的渐渗系片断,提取幼苗的DNA;建立CAPS反应体系;将PCR产物选用限制性内切酶消化控制等。 |
申请公布号 |
CN101831497B |
申请公布日期 |
2012.07.04 |
申请号 |
CN201010168152.4 |
申请日期 |
2010.05.11 |
申请人 |
新疆农业科学院园艺作物研究所 |
发明人 |
杨生保;帕提古丽;王柏柯;余庆辉;杨涛 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
乌鲁木齐新科联专利代理事务所(有限公司) 65107 |
代理人 |
欧咏 |
主权项 |
一种鉴别番茄耐盐性状的分子标记方法,其特征在于,包括以下步骤:1)耐盐主效基因定位;2)人工设计合成一对核苷酸序列作为CAPS引物,该引物是由核苷酸组成的特定序列的寡聚体,其中:正向引物:5’GCCAATCCAAACAAACCA 3’,反向引物:5’CATTGTCTCCTTCGCCTCG 3’;3)提取番茄基因组DNA,以此对引物将番茄基因组DNA进行PCR扩增,产物无需特异性内切酶酶切,就可得到有差异性的产物条带,利用此引物对的差异性产物条带就可鉴别出番茄耐盐材料和盐敏感材料;4)PCR产物在1.5%琼脂糖凝胶上电泳、溴化乙锭染色,用凝胶成像系统观察并拍照记录,耐盐材料PCR产物有1000bp的1条谱带,盐敏感材料有900bp的1条谱带。 |
地址 |
830091 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市南昌路403号 |