一种检测正畸牙根吸收的方法

摘要

本发明公开了一种检测正畸牙根吸收的方法，步骤如下：(1)龈沟液的提取；(2)龈沟液重量的测量；(3)蛋白质提取；(4)蛋白质SDS-PAGE凝胶电泳；(5)蛋白印迹；(6)数据处理：根据上述测得的龈沟液重量计算相应的单位重量龈沟液的酶含量，使用SPSS 11.0统计包，对GCF重量及酶含量进行统计学分析。本发明的方法可用于评价和筛选牙根吸收的敏感人群；评价正畸治疗前的牙根吸收的发生状态；动态监控正畸治疗中牙根吸收的发展与转归，以采取有效的措施防止牙根吸收的发生和发展。

主权项

一种检测正畸牙根吸收的方法，其特征在于，步骤如下：(1)龈沟液的提取：清洁待检测者的牙面，棉球隔湿，吹干，然后将事先经紫外线消毒的20#吸潮纸尖紧贴于牙的颊舌侧牙面的龈沟边缘，放置30秒，取出后立即放入Ep管密封，‑70℃保存，待用；每隔一周取样一次，至少取两次；(2)龈沟液重量的测量：分别称量龈沟液提取前吸潮纸尖和Ep管的重量及其提取龈沟液后的重量，两者相减即得龈沟液的重量；(3)蛋白质提取：向上述装有龈沟液的Ep管中加入20μl蛋白提取液，冰浴20‑30min，4℃下15000r/min离心10分钟后，提取20μl上清液，加等体积的蛋白上样液，煮熟5min，得蛋白液，‑20℃保存；(4)蛋白质SDS‑PAGE凝胶电泳：上述蛋白液进行SDS‑PAGE凝胶电泳，然后固定染色；(5)蛋白印迹：上述凝胶电泳完毕后，取下凝胶，用硝酸纤维素膜进行蛋白印迹，然后用标记的二抗与之反应并进行显影，显示膜上的蛋白条带，测量条带的光密度和面积，通过：蛋白裂解酶的蛋白质含量＝条带的平均光密度×条带的面积，计算蛋白裂解酶的含量；(6)数据处理：根据上述测得的龈沟液重量计算相应的单位重量龈沟液的酶含量，使用SPSS11.0统计包，对GCF重量及酶含量进行统计学分析。