发明名称 一种测定微囊藻上浮百分比的方法
摘要 一种测定微囊藻上浮百分比的方法,配制BG11培养基,灭菌后置于超净工作台中冷却;采用无菌操作的方法对微囊藻进行接种,接种量为104~105cells/mL,然后将其置于设定温度为25℃,光照强度为100μmol/m2·s的光照培养箱中进行培养;待微囊藻生长到对数期后,实验温度范围为0~30℃,光照强度范围为0~500umol/m2·s,将其转至设定为实验所需要的温度和光照强度的光照培养箱中进行培养,隔一段时间取一次样;用移液枪吸取藻液,滴一滴在细胞计数板,计数板为细胞计数板(CELL-VU),细胞计数板的计数室深度为0.02mm;将细胞计数板置于显微镜下,分别对上浮的微囊藻和总藻进行计数。
申请公布号 CN102494986A 申请公布日期 2012.06.13
申请号 CN201110373922.3 申请日期 2011.11.22
申请人 南京大学 发明人 李正魁;周涛;赵琳;吴宁梅
分类号 G01N15/14(2006.01)I;G01N15/04(2006.01)I;C12Q1/06(2006.01)I 主分类号 G01N15/14(2006.01)I
代理机构 南京天翼专利代理有限责任公司 32112 代理人 陈建和
主权项 1.一种测定微囊藻上浮百分比的方法,其特征是采用如下步骤:①配制BG11培养基,倒入锥形瓶中,灭菌后置于超净工作台中冷却;②采用无菌操作的方法对微囊藻进行接种,接种量为10<sup>4</sup>~10<sup>5</sup>cells/mL,然后将其置于设定温度为25℃,光照强度为100μmol/m<sup>2</sup>·s的光照培养箱中进行培养,每天用血球计数板进行计数,观察其生长情况;③待微囊藻生长到对数期后,实验温度范围为0~30℃,光照强度范围为0~500umol/m<sup>2</sup>·s,取样时采用无菌手法,将其转至设定为实验所需要的温度和光照强度的光照培养箱中进行培养,隔一段时间取一次样;取样所用的移液枪在超净工作台中用紫外灭菌,移液枪头在高压灭菌锅中于120℃灭菌30min,取样在超净工作台中采用无菌操作方法进行。④取样前将微囊藻摇匀,然后用移液枪吸取藻液,滴一滴在细胞计数板,计数板为细胞计数板(CELL-VU),细胞计数板的计数室深度为0.02mm;滴在细胞计数板(CELL-VU)的盖玻片边缘,使藻液缓缓渗入,多余的藻液用吸水纸吸去;⑤将细胞计数板静置;⑥将细胞计数板置于显微镜下,分别对上浮的微囊藻和总藻进行计数;⑦<img file="FDA0000110858390000011.GIF" wi="569" he="101" />其中,m<sub>上浮</sub>和m<sub>总</sub>分别代表上浮和总共的藻数目。
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