CSFV、PCV2与PRV多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR引物及其检测方法

摘要

本发明公开了一种CSFV、PCV2与PRV多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR引物及其检测方法，CSFV引物的序列如下：上游引物P1：5′-AAACGGAGGGACTAGCCGT-3′；下游引物P2：5′-TGCCATGTACAGCAGAGA-3′PRV引物的序列如下：上游引物P3：5′-CTCGCCATCGTCAGCAA-3′；下游引物P4：5′-GCTGCTCCTCCATGTCCTT-3′；PCV2引物的序列如下：上游引物P5：5′-GGGCCAGAATTCAACCTTACCC-3′；下游引物P6：5′-CGCACCTTCGGATATACTGTCA-3′。本发明通过猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒三重SYBR Green Ⅰ定量PCR检测方法，能够同时检测CSFV、PRV和PCV2 3种DNA病毒，能最少检测183拷贝猪瘟病毒、231拷贝猪伪狂犬病毒和203拷贝猪圆环病毒2型；本发明的特异性试验结果良好，只出现三个特异性的峰值，重复性试验具有很好的稳定性，为有效检测和鉴别混合感染提供了一种成本低、快速、灵敏、特异、准确的新方法，有利于妊娠母猪繁殖障碍性病毒的鉴别。

主权项

CSFV、PCV2与PRV多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR引物，其特征在于：CSFV引物的序列如下：上游引物P1：5′‑AAACGGAGGGACTAGCCGT‑3′；下游引物P2：5′‑TGCCATGTACAGCAGAGA‑3′；PRV引物的序列如下：上游引物P3：5′‑CTCGCCATCGTCAGCAA‑3′；下游引物P4：5′‑GCTGCTCCTCCATGTCCTT‑3′；PCV2引物的序列如下：上游引物P5：5′‑GGGCCAGAATTCAACCTTACCC‑3′；下游引物P6：5′‑CGCACCTTCGGATATACTGTCA‑3′。